稳转细胞株(系)在科研中应用

稳定转染细胞株，即稳转细胞株，是指在细胞中持续稳定表达特定基因或者干扰特定基因表达的细胞株。与瞬时转染相比，稳转细胞株便于长期观察基因对于细胞功能的影响及蛋白相互作用，尤其适合于体内实验。稳转细胞株稳转细胞株的构建通常是将外源基因克隆至含有某种筛选标记的载体上，将载体转染目的细胞并整合到染色体中，利用载体携带的筛选标记进行筛选，从而得到可稳定表达目的基因的细胞株。

稳转细胞株可应用于包括基因功能研究、蛋白质工程、重组抗体制备等生命科学的各个领域。与瞬时 RNA 技术干扰表达相比，构建稳转株可以达到更好的基因干扰效果。在动物成瘤实验中，稳转株以防止细胞注射入动物体内后，外源基因片段表达丢失，更好观察目的基因对肿瘤细胞长期功能影响。

稳转细胞株的构建一般可以分为两种，脂质体转染和病毒转染。脂质体转染后，单克隆筛选稳定细胞株，该方法周期长并且效率低。应用慢病毒、逆转录病毒转染，筛选稳定细胞株有更高的效率。外源插入片段大小、整合几率、整合后的稳定性等是构建稳定株的关键因素（赛业可构建稳转细胞株）。

慢病毒可以携带外源基因随机整合进基因组，宿主范围广，效率高。慢病毒方案介导外源基因整合可以适用于大部分难转染的细胞，是构建稳定株的理想方法。病毒转染法构建稳转株是一个较为复杂过程，首先需要构建载体，其次利用工具细胞包装出毒，再感染细胞及后期筛选和鉴定。充分确保外源目的基因在细胞传代过程中能稳定遗传。