化学发光免疫分析CLIA的优点
化学发光是一种特异的化学反应,有机分子吸收化学能后发生能级跃迁,产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体,当其返回到基态而发出光子,即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术,即为化学发光免疫分析。根据发光原理的不同,主要可分为化学发光免疫分析(CLIA)和化学发光酶免疫分析(CLEIA)两种。
原理
CLIA是用化学发光物质直接标记抗原或抗体;
CLEIA是在酶免疫分析完成后加入化学发光底物,产生化学发光
发光类型:
CLIA是属于闪光型;
CLEIA是辉光型
标记物
CLIA的标记物一般是吖啶酯(acrydinum esters);
CLEIA的标记物是:1.辣根过氧化物酶(HRP)/H2O2/Luminol系统;2.碱性磷酸酶(AP)/1,2二氧乙烷稳定衍生物(AMPPD)系统;
发光时间:CLIA的发光时间是零点几秒到几秒;
CLEIA的发光时间是几分钟到几小时。
另外还有一种偶合放大化学发光酶联免疫分析法(ECLIA),尽管辣根过氧化物酶(HRP)可以催化Luminol-H2O2反应体系产生化学发光,但由于该体系的检测灵敏度不够高,不能满足酶联免疫测定的要求。因此,为了提高体系的检测灵敏度,可将HRP催化H2O2氧化曙红(Eosin)的反应与该反应产物增强HRP催化luminol-H2O2的化学发光反应相偶合。
优点:
1.灵敏度高:其灵敏度可达10-16mol/L(RIA为10-12mol/L)。又如化学发光底物(如AMPPD)可检测出的碱性磷酸酶的浓度比显色底物要灵敏5х105倍。2.宽的线性动力学范围:发光强度在4~6个量级之间与测定物
2.宽的线性动力学范围:发光强度在4~6个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度(OD值)为2.0的范围相比,优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动力学范围,但放射性限制了其应用。
3.光信号持续时间长:辉光型的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天,简化了实验操作及测量。
4.分析方法简便快速:绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂(或复合试剂)的一步模式。
5.结果稳定、误差小:样品系直接自己发光,不需要任何光源照射,免除了各种可能因素(光源稳定性、光散射、光波选择器等)给分析带来的影响,使分析结果灵敏稳定可靠。
6.安全性好及使用期长:在上述优点前提下,更免除了使用放射性物质。
TOPS /N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐
ADPS/N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐
ALPS/N-乙基-N-(3-磺丙基)苯胺钠盐
DAOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐
HDAOS/N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐
MADB/N,N-二(4-磺丁基)-3,5-二甲基苯胺钠盐
三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐Tris-HCL
三(羟甲基)氨基甲烷Tris
N,N-二羟乙基甘氨酸BICINE
3-(环己胺)-1-丙磺酸CAPS
3-吗啉丙磺酸MOPS
N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸TAPS
N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-3-丙磺酸 EPPS
3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸MOPSO
4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES
哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES
磷酸烯醇丙酮酸三(环已胺)盐PEP
病毒保存液
乙二胺四乙酸二钾/EDTA二钾
血清分离胶/血液分离胶
肝素抗凝剂
乙二胺四乙酸三钾/EDTA三钾
血液促凝剂
高效促凝粉
高效硅化剂
水溶性硅化剂
草酸钾
钙离子螫合抗凝剂
以上内容来自小编zzj 2021.1.25