昆虫杆状病毒系统蛋白表达纯化实验服务周期

昆虫杆状病毒表达载体系统(BEVS)是一种利用杆状病毒作为外源基因的载体，通过感染昆虫细胞或者昆虫幼虫来表达外源蛋白的系统，是重要的真核表达系统之一。

1.      昆虫杆状病毒表达系统的优势

1)     杆状病毒安全性能好

2)     携带外源基因的容量大

3)     外源目的蛋白质表达水平高

4)     表达的真核基因产品可以进行正确的折叠与修饰，因而具有很好的生物活性

2.      与哺乳细胞相比昆虫表达系统的优势

1)     培养条件相对简单，不需要通过CO2

2)     培养成本相对合理

3)     不容易被细菌污染

4)     得到的蛋白含量高

服务流程

昆虫杆状病毒表达载体和表达细胞的简介

常见的表达载体及特征

Vector	Features
pFastBac1	Strong AcMNPV polyhedrin(PH) promoter for high level protein expression Large multiple cloning site for simplified cloning
pFastBacHT	Strong polyhedrin(PH) promoter for high-level protein expression N-terminal 6His tag for purification of recombinant fusion protein using metalchelating resin and aTEV protease cleavage site for removal of the 6His tag following protein purification Vector supplied in 3 reading frames for simplified cloning
pFastVacDual	Two strong baculovirus promoters(PH and p10) to allow simultaneous expression of two proteins Two large multiple cloning sites for simplified cloning

常见的表达细胞及特征

细胞	来源	用途
Sf9	Sf9细胞系克隆分IPLBSF21-AE（Sf21），来源于秋蝇蠕虫（草地夜蛾）蛹的卵巢组织	适于转染、纯化、生产高滴度病毒、铺板以及表达重组蛋白
Sf21	Sf21细胞衍生于IPLBSF-21细胞系，也来源于秋蝇蠕虫（草地夜蛾）蛹的卵巢组织	也适于转染、纯化、生产高滴度病毒、铺板以及表达重组蛋白。在一些结构上Sf21细胞细胞可能比Sf9细胞表达蛋白量高
Hi5	Hi5细胞系源于博伊斯汤普森研究所对植物的研究，伊萨卡、纽约和源于白菜尺蠖卵巢细胞，粉纹夜蛾细胞	Hi5细胞表达重组病毒性能优越。也经常用于转染和空斑纯化，并且Hi5细胞系更适合表达分泌性重组蛋白
S2	S2是一种果蝇晚期胚胎细胞。其中多为雌性四倍体细胞，也有双倍体细胞	比较适合重组蛋白的表达