组织学技术 脱水、透明
脱水：用化学试剂将组织内的水分全部清除（脱水剂）
透明：用一些试剂将组织内的脱水剂全部置换并能与包埋剂相融（透明剂）。透明剂是脱水剂与包埋剂的媒介。
脱水剂不溶于包埋剂如石蜡，需要媒介物置换脱水剂
脱水剂溶于包埋剂则具有透明作用，则不需媒介物（透明剂）
一 组织块脱水透明
1 纯脱水剂脱水
（1）酒精（alcohol）：最常用
脱水能力强，能使组织硬化
但易使组织收缩变脆
脱水从70%酒精开始，切勿直接用高浓度酒精脱水
脱水时间不长，在70~90%酒精内适当延长。70%酒精可长时期保存组织
胚胎组织或较柔软组织块：从更低浓度开始，如10%、35%或50%酒精
脱水时间：根据组织块大小及硬度、时令（冬春和夏秋）、组织的种类、固定剂等而定。
3~5毫米厚的组织块，各级酒精小于3~6小时，无水酒精1~2小时（脆化组织）
实质性器官如肝、脾、肾、淋巴结等赠能浸泡太久（易于硬脆）
脂肪组织和疏松结缔组织要长央95%酒精内尽量脱去脂肪和残存的水分
骨、牙等坚硬组织脱水时间不宜过长
含重铬酸钾固定液固定的组织大多有硬脆现象，在酒精内过久会增加其脆性
无水酒精应保持无水
（2）丙酮(acteone)
脱水能力比酒精强
对组织块收缩较大
主要用于快速脱水或固定兼脱水，1~3小时左右
2 脱水兼透明剂脱水和透明
（1）正丁醇（butyl alcohol）
微溶于水，水溶解度为8.3%，脱水能力弱
能与水、酒精与石蜡混合。经它脱水的组织块，直接浸蜡包埋
很少引起组织块收缩与变脆，适于制作植物标本。
一般用法：
组织块固定、冲洗→50%酒精→70%酒精→80%酒精→正丁醇12~24小时→浸蜡
其它用法：
组织块从5%酒精脱水→30%酒精→正丁醇-95%酒精-蒸馏水（10：40：50）12~24小时→正丁醇-95%酒精-蒸馏水（20：50：30）12~24小时→正丁醇-95%酒精-蒸馏水（35：50：15）1小时→正丁醇-95%酒精-蒸馏水（55：40：5）1小时→正丁醇-无水酒精（75：25）1小时→正丁醇5~24小时→正丁醇石蜡（1：1）1~3小时→浸蜡包埋
（2）叔丁醇（tert-Butanol）
能与水、酒精混合，溶于石蜡
对组织块无收缩及硬化
多用于特殊要求及精制标本制作
（3）松脂醇（松节油透醇terpineol ）：
最后一次二氧陆环脱水，加入5~10%二甲苯或氯仿
（4）四氢呋喃（一氧五环、氧杂环戊烷、四亚甲基氧）
四氢呋喃（1.4-环氧丁烷、四甲撑氧、氧杂环戊烷、一氧五环，Tetrahydrofuran，oxolane，THF）
溶于水、乙醇、乙醚、丙酮、苯等多数有机溶剂
（5）二氧陆环（Dioxane）
无色液体，易挥发
能与水、酒精、二甲苯及石蜡等以任何比例混合
既可脱水又能透明
脱水的一直接浸蜡包埋
对组织块收缩少，硬化程度低
但有毒性，性价格较高
如含水，可用无水硫酸铜、无水氯化钙吸收
用过的二氧六环，也可通过无水硫酸铜、无水氯化钙回收
能溶解苦味酸和升汞。用苦味酸、升汞及其混合液固定的组织，脱水至纯二氧六环后浸蜡包埋二氧六环的使用方法：
*组织块固定水洗，经各级酒精至95%酒精，立即转入二氧六环脱水兼透明2~3小时，浸蜡
*组织块固定水洗，直接转入纯二氧六环3~5小时换新温文尔雅两次败二氧六环石蜡等量混合液2小时，再浸蜡包埋
*组织块固定水洗，转入30%酒精，依次转入50%、70%、90%、100%二氧六环液（30%二氧六环 ：二氧六环30毫升，蒸馏水70毫升）
由Bouin液固定的组织，经30~50%酒精脱水，移入70~90%酒精及无水二氧六环脱水
较柔软及易收缩的组织，水洗，直接入30~100%二氧六环逐级脱水
为使二氧六环处理的组织块能更好浸蜡，最后浸的二氧六环后中，加入5~10%二甲苯或氯仿
3 透明
（1）二甲苯（Dimethylbenzene，Xylenes）
易溶于无水酒精，不溶于水，有毒，易挥发
溶于石蜡，易挥发，长期接触，对黏膜有刺激作用
透明能力强，易使组织收缩、变脆。组织块在南田村中不宜久留，小块组织30分钟，较大组织块适当延长，不超过2小时
组织块在二甲苯中呈白色混浊状，表示脱水不彻底
减少组织收缩，可在无水酒精后先经无水酒精二甲苯混合液（2：1，1：1）再入纯二甲苯
保持无水（发浑则含水）
（2）甲苯（甲基苯，Toluene）
能与乙醇、乙醚、丙酮、氯仿、二硫化碳和 冰乙酸 混溶，极微溶于水
甲苯12~24小时也不易变脆
可代替二甲苯透明
（3）苯（Benzene,）
难溶于水，易溶于有机溶剂，本身也可作为有机溶剂
对组织收缩小，易挥发，易燃，有毒。
经苯透明的组织块比二甲苯透明的硬度小，延长时间也 不易变脆且易干涸
95%酒精与苯、甲苯、二甲苯等量混合液可代替无水酒精
（4）冬青油（邻羟基苯甲酸甲酯，冬绿油，甲基-2-羟基苯甲酸酯，水杨酸甲酯，柳酸甲酯，2-羟基苯甲酸甲酯Oils, wintergreen; Sweet birch oil; OIL OF WINTERGREEN; Analgit; Spicewood Oil; 2-Carbomethoxyphenol）
无色油样液体，有特殊气味及甜味
易溶于醇、醚和冰醋酸，难溶于水
浸入慢
组织块脱水至95%酒精→冬青油数小时至数天，最好经无水酒精脱水后再入冬青油
制作骨组织切片时，用冬青油-苯甲酸甲酯（5：3）透明
（5）苯甲酸甲酯（ Methyl benzoate）
难溶于水，溶于醚
组织块脱水至95%酒精，直接入苯甲酸甲酯透明12~24小时9经或不经二甲苯透明）
对组织块收缩和硬化极小
能溶解火棉胶，用于火棉胶包埋切片
（6）二氧陆环（1,4-Dioxane）
见脱水（5）二氧济环
（7）氯仿（三氯甲烷）
透明比二甲苯和苯差
透明时间达24小时
溶于醇、醚、苯等，微溶于水，极易挥发，浸蜡时残存的氯仿易于挥发。多用于大块组织透明
用法：
组织经各级酒精脱水后直接转入氯仿；
组织块经酒精脱水后转入氯仿无水酒精混合液（3：1）1小时，经氯仿二次各2小时至组织块下沉至瓶底表示透明完好，转入氯仿石蜡等量混合液（45℃以下）1小时，再浸蜡
先用苯胺油透明，经氯仿二次，每次可缩短5~30分钟，浸蜡迅速完成
氯仿还用于火棉胶石蜡双重包埋中火棉胶𡐇的透明，24小时或更长
在快速火棉胶包埋中作凝固剂，利用氯仿蒸汽硬化火棉胶块
（8）香柏油（Cedar wood oil）粗制品
溶于醇，为酒精脱水后的良好透明剂
对组织收缩及硬化比苯、二甲苯、氯仿小
透明慢。小块组织12小时以上，透明后须经二甲苯或苯洗后才能易于浸蜡
（9）苯胺油（安尼林油，氨基苯aniline oil）：
微溶于水，参与醇醚、苯及多种有机溶剂混合，随水蒸汽挥发，应避光密封保存
脱水兼透明剂：
组织块经各级酒精至70%酒精亦能与它混合
一般在酒精中易脆的组织如蛙卵，用苯胺油透明
70%酒精苯胺油（1：1），85%酒精苯胺油（1：2），95%酒精苯胺油（1：2），各2~6小时，纯苯胺油待至全部透明，最后用甲苯洗两次，易于浸蜡
苯胺油用于分色，苯胺酒精
二 组织切片、铺片、涂片脱水与透明
各种浓度酒精：逐渐转换组织、切片中的水分
1 丙酮：
用于染色后切片的脱水。脱水快，不易褪去切片上的颜色。常用于甲基绿派若宁显示DNA和RNA切片的脱水
95%酒精一-二甲苯：代替无水酒精而不使组织发脆
石炭酸（苯酚，羟基苯carbolic acid）二甲苯：脱水（切片或铺片含 水较多）
木馏油（木焦油creosote oil）二甲苯：脱水（切片或铺片含 水较多）
2 二甲苯：
用于切片封固前的透明，不会使染色的切片褪色并获得最佳折光率。
树胶的溶剂。
3 冬青油：
染色后整体标本和胚胎标本透明。切片染色后，冬青油透明，不加盖玻片封固，临时镜检而不干