哮喘小鼠模型实验技术原理

哮喘小鼠模型构建：

1. 明矾致敏佐剂10%明矾溶液（溶于双蒸水）2ml与500mg/mlOVA（溶于PBS）2ml等量混合后，用NAOH调PH值为6.5.室温孵育60min，离心5min，去掉上清液，重溶于2mlBPS。致敏时每只老鼠腹腔注射200ul，其中含2mg明矾和100ugOVA

2. 致敏：小鼠分别于第0、14天是腹腔注射明矾致敏佐剂0.2ml，对照组注射相同剂量的PBS溶液，正常饮食饲养。

3. 激发：雾化吸入，第21天时小鼠放入有机玻璃箱，5%OVA雾化吸入，每天30min。末次致敏后24h内检测。以小鼠出现烦躁不安、呼吸急促、腹腔痉挛等阳性反应作为造模成功的标准。对照组采用PBS雾化吸入，其他操作均相同。

4. 末次激发24h麻醉小鼠，摘眼球取血，室温静置24h后于4℃3000r离心10min提取血清，放入-80℃冰箱冻存。取左肺组织于4%多聚甲醛溶液中固定用于病理染色；右肺组织液氮冷冻，-80℃保存用于分生标本。

哮 喘小鼠模型特点：哮 喘模型组小鼠在激发开始后出现打喷嚏、点头呼吸、呼吸急促、啸鸣音、腹肌收缩、烦躁等典型哮 喘发作症状，并且后期观察中发现饮食减少、毛色无光泽、行动迟缓及体重逐渐下降。肺组织切片可进行HE染色、MBP染色、刚果红染色及EOS浸润等观察小鼠肺部炎症情况。主要测量其中的白细胞和嗜酸性粒细胞的数量。

比较医学：三种方法构建哮 喘小鼠模型分别是HDM、OVA、TDI。 HDM、OVA所诱导的哮 喘小鼠BALF中细胞组分主要以嗜酸性粒细胞为主。三组哮 喘小鼠在接受不同浓度的雾化后气道阻力明显增高，与浓度呈正相关，而HDM和OVA诱导的哮 喘小鼠气道阻力较TDI更高。不同造模方式建立的哮 喘小鼠模型在气道反应性、气道炎症和病理特点各有不同，HDM和OVA哮 喘小鼠具有典型的嗜酸性粒细胞哮 喘表现，而TDI 哮 喘小鼠表现为混合细胞性哮 喘动物模型。