详解两款POCT核酸产品：Sense PK 优思达

Sense Biodetection Limited（Sense），来自英国牛津和剑桥的分子诊断公司。他们的口号是：

2021年4月20日，Sense Biodetection宣布，已筹集了5,000万美元的B轮融资，以支持其Veros COVID-19快速分子测试的商业化以及不断发展的无仪器测试产品组合。

要素如下：

• 总部位于英国阿宾登
• 快速等温扩增技术Veros平台，用于POCT检测各种疾病
• Veros测试是一次性的

正在开发的新冠核酸检测试剂如下：

Sense的Veros™SARS-CoV-2是一项简单的一次性测试，使用鼻拭子样本即可提供超快速的结果，而无需复杂的硬件进行温度循环和荧光检测。作为分子测试，其性能与金标准实验室测试相当，并且可在10分钟内获得结果。

看到这里，立马想到了优思达在CACLP上展示的家用POCT核酸试剂。采用交叉引物恒温扩增CPA技术，装置自带电源，同时检测新冠，甲流，乙流和人源内标。

操作过程：

• 抽提液加入加样孔
• 按下启动键
• 反应30分钟
• 打开加样孔，加入清洗液，静置5分钟
• 读结果

两相比较：

最大的差异是：10分钟 VS 35分钟

不过sense 还没上市。

原理图如下，来自Sense的专利，切口酶恒温扩增反应技术（NEAR）？？

最后检测是通过碳颗粒标记的层析试纸。

以下关于NEAR来自 知乎

切刻内切酶（NEAR）恒温扩增是目前相关研究最少的一种恒温核酸扩增技术。它是在2008年由Ionian科技公司的研究人员开发并申请专利的（Brain等2009）。Ionian是加州的初创公司，成立于2000年，在2010年被Alere收购。而后Alere在2017年被雅培收购，NEAR成为雅培的专利。

NEAR是一种链置换放大技术，其原理是在核酸切刻内切酶切刻形成的裂口处，通过聚合酶的作用以dNTPs为原料从裂口处的3’端聚合延伸，置换出等位的DNA链，由此又形成了新的完整的含有切刻酶识别位点的DNA序列。这条双链再次被核酸切刻内切酶识别切割，进而开始“聚合-切刻”的循环，产生大量被置换下来的DNA单链，形成指数级扩增。

NEAR的优点：

①速度快（最快5分钟可以得到阳性结果）；

②灵敏度高（初始只需要数百个病毒拷贝）；

③区别于引物设计较复杂的LAMP技术，NEAR技术反应形式多样，可满足不同的扩增需求；

④反应稳定性好

NEAR的缺点：

①短序列的设计存在高假阳性的可能；

②仪器的通量很小，一次只能检测一个样本；

③反应机制复杂、产物产量易受扩增模板限制，使得后期扩增从指数增长变为线性增长；

④检测的重复性略低于qPCR；

⑤NEAR恒温扩增技术的特异性与灵敏度依赖于分子信标引物和Nicking酶，分子信标引物的设计难度大，Nicking酶与其他恒温扩增酶一般都普遍比传统的实时荧光PCR酶要贵，故在检测成本和应用范围等方面，NEAR恒温扩增技术逊于qPCR。

被雅培收购的Alere是唯一一家使用NEAR技术开发人类疾病诊断试剂盒及仪器的公司。Alere的Influenza A和B的检测试剂盒最快5min检出阳性，7min阳性检出率95%，13min可以确定阴性。另一个关于StrepA的检测试剂盒最快2min检出阳性，3min阳性检出率99%，6min可以确定阴性。这是关于Flu和StrepA最快的分子的检测试剂盒，但ID NOW仪器的通量很小，一次只能检测一个样本。目前的新冠疫情下，实验室的大量检测仍然需要依赖传统高通量qPCR的批量检测，ID NOW无法对于大量样本的检测能力提升带来较大的帮助。而ID NOW属于POCT范畴，在医生办公室、紧急护理诊所和医院急诊科等广泛的医疗场景中都可以进行检测，可以起到一定的市场补充作用。

10分钟内完成检测，扩增的时间，几乎只要5分钟左右，性能会怎样？此处留给大咖来评论，请点击下面的链接留言，谢谢

文章来源于IVD工具人，作者上海滩老纪，文章仅代表作者个人观点，欢迎留言交流。