MTT试剂溶液的配制方法

通常MTT试剂浓度为5mg/ml。因此,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的**,放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器好用铝箔纸包住。

需要注意的是,MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞数。在用酶标仪检测结果的时候,为了实验结果的线性,MTT 吸光度好在0-0.7 范围内。

MTT试剂一般好现用现配,过滤后4℃避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存,避免反复冻融,好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里,用的时候现配,直接往培养板中加,没必要一下子配那么多,尤其当MTT变为灰绿色时就不能再用了。

MTT试剂有致癌性,用的时候小心,有条件好带那种透明的簿膜手套。配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感;往96孔板加时不避光也没有关系,毕竟时间较短,或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉。配制MTT时用用PBS溶解,也有人用生理盐水配,60℃水浴助溶。

PBS配制方法:Nacl 8g、Kcl 0.2g、Na2HPO4 1.44g、KH2PO4 0.24g,调pH 7.4,定容1L。

(0)

相关推荐

  • MPB:中农戴兆来组-​猪肠道微生物样品的采集与核酸提取

    为进一步提高<微生物组实验手册>稿件质量,本项目新增大众评审环节.文章在通过同行评审后,采用公众号推送方式分享全文,任何人均可在线提交修改意见.公众号格式显示略有问题,建议电脑端点击文末阅 ...

  • MPB:上海交大王风平组-​海洋沉积物样品细胞提取及荧光显微镜计数法

    为进一步提高<微生物组实验手册>稿件质量,本项目新增大众评审环节.文章在通过同行评审后,采用公众号推送方式分享全文,任何人均可在线提交修改意见.公众号格式显示略有问题,建议电脑端点击文末阅 ...

  • MTT法检测细胞增殖(附视频)

    细胞增殖基础知识可阅读文章: 医学科研实验基础知识笔记(一):细胞增殖 1.原理 活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞 ...

  • 【新手福利】初识外泌体(六)

    大昌华嘉Particle Metrix,纳米颗粒跟踪分析仪 本周的周总结会在周日准时发送给大家.今天给各位新进外泌体领域的朋友第六期基础知识介绍.今天主要科普如下. 图片来源:Shedding lig ...

  • MTT试剂溶液的配制方法—贴壁细胞

    MTT试剂溶液的配制方法—贴壁细胞

  • 实验室常用的试剂、缓冲液配制方法汇总!

    食品实验室服务 1.2 N NaOH 12.2.5 N HCl 3.5 M NaCl 4.1M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0) 5.1.5 M Tris-HCl (pH8.8) 6. ...

  • MTT试剂的配制方法

    常,此法中的MTT 浓度为5mg/ml.因此,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的**,放4℃ 避光保存即可.在配制 ...

  • MTT试剂配制方法—悬浮细胞

    检查原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT试剂还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能.二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶标仪在490 ...

  • MTT试剂的用途、原理和配制方法

    MTT试剂主要有两个用途: 1.**(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培育的细胞毒性的测定: 2.细胞增殖及细胞活性测定. MTT试剂原理: 检查原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MT ...

  • MTT试剂实验方法及技巧

    ⒈选择适当的细胞接种浓度.一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞.但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试剂试验前,要进行预实验检测其贴壁率.倍增时间以及不同接种细 ...

  • 值得收藏!—超级常用分子生物学试剂配制方法倾囊相授!

    分子生物学试验所用水都是去离子水ddH2O双蒸水级别的,所以器皿都要用去离子水冲洗两三遍:配制好试剂的贴标签标注,包括试剂名称.配制日期.配制人:加热和搅拌可以促溶解.1电泳类 DNA电泳试剂成分及终 ...

  • 风湿、类风湿关节炎通经止痛健身酒及其配制方法.pdf

    本发明涉及保健酒,一种通经止痛健身酒及其制备方法.     中医学论述,风.寒.湿.热等外邪侵袭人体,阴闭经络,气血运行不畅,致使肌肉.筋骨.关节发生疼痛.麻木,重着屈伸不利,甚或关节肿大灼热,此为痹 ...

  • 麻辣烫7:四种最常用的蘸碟的配制方法,做小吃有这个就够了

    今天我们说说麻辣烫调味的又一个重要环节,蘸碟,这个也是最能发扬个性和个人喜好的一个环节,很多的麻辣烫店都是把一些主要的调味料排开,让顾客自由发挥. 不同类型的酱汁 但一般的生意比较好的店或摊位,总有一 ...