Hp感染及其相关疾病防控100问：Hp感染检测/诊断7-12问
7.14C尿素呼气试验安全吗？
14C是放射性同位素，将其用于幽门螺杆菌感染检测是否安全颇受关注。事实上，14C尿素呼气试验的安全性很高，理由是：（1）14C释放的是β射线，能量低、穿透力弱（空气中传播距离22cm，一层纸就可将其阻挡）。（2）应用的
14C剂量很低（ ≤ 37 kBq，或≤ 1 μCi )，一次检测产生的辐射仅1.59μSv（微西弗），相当于我国《辐射防护规定（GB8703-88）》中规定的公众个人年剂量限值1mSv的六百三十分之一。（3）虽然14C物理半衰期很长（>5000年），但
14C-尿素的生物半衰期很短（约6小时），因为摄入的14-尿素被幽门螺杆菌尿素酶分解成14CO2后很快从呼气排出，而未分解的14C-尿素则作为终末代谢产物从尿中排出（图4-6）。
尽管14C-尿素呼气试验安全性很高，但毕竟14C是放射性同位素，而且有无放射性的13C尿素呼气试验可以替代，因此国内、外幽门螺杆菌感染处理共识均认为
14C-尿素呼气试验不应用于儿童和孕妇。14C-尿素的其生物半衰期很短（6小时），因此有一定间隔时间的备孕期男女不在此限。鉴于14C-尿素呼气试验的安全性高，国家相关部门文件明确表明，使用14C-尿素呼气试验药盒用于诊断幽门螺杆菌感染医疗机构无需持有《放射性药品使用许可证》（豁免放射性管理），无须采取任何辐射防护措施。
主要参考文献：
1. Raju GS1, Smith MJ, Morton D, Bardhan KD. Mini-dose (1-microCi) 14C-urea breath test for the detection of Helicobacter pylori. Am J Gastroenterol. 1994;89:1027-31.
2. Bentur Y, Matsui D, Koren G. Safety of 14C-UBT for diagnosis of Helicobacter pylori infection in pregnancy. Can Fam Physician. 2009;55:479-80.
3. Wang YK, Kuo FC, Liu CJ, et al. Diagnosis of Helicobacter pylori infection: Current options and developments. World J Gastroenterol. 2015;21:11221-35.
4. Malfertheiner P, Megraud F, O'Morain CA, et al. Management of Helicobacter pylori infection-the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017;66:6-30.
5. 国家环境保护总局办公厅-环办函[2002]143号：关于批准C-14尿素胶囊用于幽门螺杆菌感染诊断放射性豁免管理申请的函
8. 呼气试验的检测值是否与胃内幽门螺杆菌数量呈正相关？
尿素呼气试验的检测值（DOB或dpm）受很多因素影响，包括同位素尿素剂量/剂型（胶囊、非胶囊）、有无试餐和试餐种类、胃排空时间、幽门螺杆菌密度（数量）、幽门螺杆菌尿素酶量/活性、气体收集时间、检测仪器种类/敏感性等。如果除细菌密度外的其他影响因素均能严格控制，则幽门螺杆菌密度与尿素呼气试验的检测值基本上呈相关。事实上，不同个体之间以及同一个体不同时间胃排空时间、幽门螺杆菌尿素酶量/活性等差异均是不可控影响因素，因此检测值不能准确反映细菌数量，也就是说两者不完全呈正相关。
尽管尿素呼气试验的结果用数值表示，似乎可以定量，但实际上仅作为定性指标应用，其判断的是幽门螺杆菌阳性还是阴性，而不是判断细菌数量多少。一般认为，检测值偏离临界值越大，其提示阳性或阴性的可靠性越高。鉴于尿素呼气试验的实质是定性检测，因此有可能会出现幽门螺杆菌根除治疗后检测值比根除治疗前高的情况，但这只是说明幽门螺杆菌未根除，而不是说明根除治疗后幽门螺杆菌更多。
主要参考文献：
1. Debongnie JC, Pauwels S, Raat A, et al. Quantification of Helicobacter pylori infection in gastritis and ulcer disease using a simple and rapid carbon-14-urea breath test. J Nucl Med. 1991;32:1192-8.
2. Desroches JJ, Lahaie RG, Picard M, et al. Methodological validation and clinical usefulness of carbon-14-urea breath test for documentation of presence and eradication of Helicobacter pylori infection. J Nucl Med. 1997 ;38:1141-5.
3. Best LM1, Takwoingi Y, Siddique, et al. Non-invasive diagnostic tests for Helicobacter pylori infection. Cochrane Database Syst Rev. 2018;3:CD012080.
4. Gisbert JP, Pajares JM. Review article: 13C-urea breath test in the diagnosis of Helicobacter pylori infection -- a critical review. Aliment Pharmacol Ther. 2004;20:1001-17.
9.13C-尿素呼气试验中，同位素尿素剂量大小对检测的准确性有何影响？
同位素尿素是尿素呼气试验（UBT）中的示踪剂，UBT检测的是13C-尿素分解后从呼气中排出的13CO2， 因此同位素尿素的剂量会直接影响检测13CO2的DOB值。DOB值是一个定量指标，通常以‰表示，如24‰。服用的同位素尿素剂量大小可直接影响DOB值高低。由于影响DOB值的因素很多，DOB值高低并不能准确反映感染的幽门螺杆菌数量，因此定量的DOB值实际上仅用作为定性指标（阴性/阳性）。
研究显示，服用的同位素尿素剂量越大，呼气中DOB值就越高，检测准确性就越可靠，但费用会相应增加。反之，应用的同位素尿素剂量太低时，检测幽门螺杆菌的假阴性率增加。目前认为应用设计良好的呼气试验方案，同位素尿素剂量在100~50mg范围的检测准确性可以得到保证。
主要参考文献：
1. Gisbert JP, Pajares JM. Review article: 13C-urea breath test in the diagnosis of Helicobacter pylori infection -- a critical review. Aliment Pharmacol Ther. 2004;20:1001-17.
2. Graham DY, Miftahussurur M. Helicobacter pylori urease for diagnosis of Helicobacter pylori infection: A mini review. J Adv Res. 2018;13:51-57.
10. 尿素呼气试验诊断幽门螺杆菌感染需要注意什么？
尿素呼气试验被认为是非侵入性诊断幽门螺杆菌感染的“金标准”，但需要指出的是：(1)尿素呼气试验检测幽门螺杆菌是一种间接检测方法，因为其检测的是尿素酶活性而不是细菌本身，需要严格排除假阳性和假阴性。（2）这一“金标准”的确立是基于严格考核、验证和规范操作。
检测试剂/设备提供方为临床应用提供试剂、操作方法和临界值（cut-off value）, 并提供基于临界值与真正“金标准”对照诊断幽门螺杆菌感染的敏感性、特异性等质量指标。临界值是判断幽门螺杆菌感染的关键指标，影响因素很多，包括同位素尿素剂量/剂型、有无试餐、气体收集时间和检测仪器类型/性能等。呼气试验操作者必须严格按照试剂提供方的要求进行操作。应用有高质量指标的试剂和规范操作是尿素呼气试验成为诊断幽门螺杆菌感染“金标准”基本要求。
临床医生看到的仅仅是检测值和临界值（13C-尿素呼气试验DOB值，14C尿素呼气试验的dpm值），看不到设定临界值相关背景资料。检测值的分析需要注意以下问题：（1）尿素呼气试验检测值处于临界值附近时，结果不可靠，不排除假阴性或假阳性可能，可间隔一段时间后再次检测或采用其他方法检测。（2）检测存在假阳性和假阴性问题。检测值提示阴性时，需排除根除治疗结束未满4周、检测前服用PPI、抗生素和铋剂等情况。（3）胃部分切除术后患者检测准确性降低，假阳性率高。
主要参考文献：
1. Gisbert JP, Olivares D, Jimenez I, et al. Long-term follow-up of 13C-urea breath test results after Helicobacter pylori eradication: frequency and significance of borderline delta13CO2 values. Aliment Pharmacol Ther. 2006;23:275-80.
2. Best LM, Takwoingi Y, Siddique, et al. Non-invasive diagnostic tests for Helicobacter pylori infection. Cochrane Database Syst Rev. 2018 Mar 15;3:CD012080.
3. Tian XY, Zhu H, Zhao J, She Q, Zhang GX. Diagnostic performance of urea breath test, rapid urea test, and histology for Helicobacter pylori infection in patients with partial gastrectomy: a meta-analysis. J Clin Gastroenterol. 2012;46:285-92.
4. Gisbert JP, Pajares JM. Review article: 13C-urea breath test in the diagnosis of Helicobacter pylori infection -- a critical review. Aliment Pharmacol Ther. 2004 ;20:1001-17.
11. 什么是幽门螺杆菌血清学诊断？
幽门螺杆菌感染可刺激人体产生免疫反应，产生相应的抗幽门螺杆菌抗体, 包括IgG、IgA和IgM抗体。IgM抗体提示急性感染，在血液中存在时间短；IgA抗体主要存在于胃液中；IgG抗体可较长时间存在于外周血中。抽取或针刺获取少量血液，应用含有幽门螺杆菌抗原的特定试剂，检测幽门螺杆菌血清抗体。这一方法具有非侵入性、操作简便、快速和相对价廉的特点。
目前常用的血清学诊断方法是检测血清抗幽门螺杆菌抗体IgG，常规方法采用的是定性（仅区分阳性和阴性）而不是定量检测。这一抗体在胃幽门螺杆菌消失后，仍可在患者血清中较长时期（1年至数年）存在，由此带来以下局限性：（1）结果阳性不能明确区分现症感染还是曾经有过感染，所以结果阳性一般不作为实施根除治疗依据。（2）不能用于评估根除治疗后的效果。
不同幽门螺杆菌菌株之间的抗原存在异质性，其抗原与其他细菌存在交叉可能，因此相关试剂检测的准确性需要在当地人群中预先验证。目前幽门螺杆菌的血清学诊断主要用于幽门螺杆菌感染的流行病学调查，了解人群中的幽门螺杆菌感染率。
血清学方法检测幽门螺杆菌感染的优点是不受检测前应用抑制胃酸分泌药（如质子泵抑制剂等）、抗生素、铋剂等影响。下列情况下其他方法检测幽门螺杆菌的假阴性率偏高，如近期未接受过根除治疗，血清学方法检测阳性可作为现症感染，进行根除治疗：（1）消化性溃疡出血、重度弥漫性萎缩性胃炎、胃MALT淋巴瘤等(图4-7)；（2）难以停止应用质子泵抑制剂等药物。
主要参考文献：
1. 刘文忠、谢勇、陆红等. 第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告 中华消化杂志 2017;37:364-378
2. Wang YK, Kuo FC, Liu CJ, et al. Diagnosis of Helicobacter pylori infection: Current options and developments. World J Gastroenterol. 2015;21:11221-35.
3. Malfertheiner P, Megraud F, O'Morain CA, et al. Management of Helicobacter pylori infection--the Maastricht IV/ Florence Consensus Report. Gut. 2012;61:646-64.
4. Sabbagh P, Mohammadnia-Afrouzi M, Javanian M, et al. Diagnostic methods for Helicobacter pylori infection: ideals, options, and limitations. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2019;38:55-66.
12. 什么是粪便幽门螺杆菌抗原试验
幽门螺杆菌粪便抗原试验（stool antigen test，SAT），是一种非侵入性检测方法，应用幽门螺杆菌特异的抗体（多克隆或单克隆）检测幽门螺杆菌抗原。
幽门螺杆菌定植于胃黏膜上皮细胞表面，可随胃黏膜上皮细胞更新而脱落，经胃肠道从粪便排出。用免疫学方法（酶免疫分析法或免疫层析法）检测粪便中的幽门螺杆菌抗原即可判定受检者是否有幽门螺杆菌现症感染。
应用单克隆抗体的SAT方法检测幽门螺杆菌的准确性与尿素呼气试验基本相当。本试验的其他优点是：（1）不需要口服任何试剂，适用于所有年龄和类型的受检查者，如婴幼儿、精神障碍患者、胃部分切除术后患者等。（2）不需要昂贵的仪器，操作安全、简便、快速。（3）检测结果不受应用PPI影响。
由于不同幽门螺杆菌菌株抗原存在差异，SAT试剂检测准确性在应用前需在当地进行验证。虽然SAT检测幽门螺杆菌有不少优点，但由于粪便标本收集不便和标本需要冷藏或冷冻保存，影响接受度，其在临床上应用不如尿素呼气试验普遍。
主要参考文献：
1. Korkmaz H, Kesli R, Karabagli P, Terzi Y. Comparison of the diagnostic accuracy of five different stool antigen tests for the diagnosis of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 2013;18:384-91
2. Atkinson NS1, Braden B2. Helicobacter Pylori Infection: Diagnostic Strategies in Primary Diagnosis and After Therapy. Dig Dis Sci. 2016;61:19-24.
3. Sabbagh P, Mohammadnia-Afrouzi M, Javanian M, et al. Diagnostic methods for Helicobacter pylori infection: ideals, options, and limitations. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2019;38:55-66.
4. Ignatius R, Berg C, Weiland C, Darmer A, et al. Accurate Detection of Helicobacter pylori Antigen in Human Stool Specimens by Two Novel Immunoassays. Eur J Microbiol Immunol (Bp). 2019;9:29-31.