制何首乌致小鼠网状内皮系统对血流中 惰性炭粒的吞噬廓清能力的影响
韩宁娟 １ ，王 莉 ２ ，方欢乐 １ ，牛 睿 １
（ １． 西安培华学院，陕西 西安 ７１００６５ ； ２． 陕西省彬县动物卫生监督所，陕西 彬县 ７１３５００ ）
摘 要：目的：研究不同浓度的制何首乌水煎浓缩液致小鼠网状内皮系统对血流中惰性炭粒的吞噬廓清能力的影响，探讨制何首乌调整免疫的最佳浓度。方法：以小鼠为实验对象，用 ２ｇ ／ ｍＬ （大剂量）、 １ｇ ／ ｍＬ （中剂量）、 ０．５ｇ ／ ｍＬ（小剂量）三种不同浓度的制何首乌水煎液给小鼠灌胃 １２ｄ ，采用炭粒廓清法来检测 ＲＥＳ 吞噬异物的能力。结果：大剂量能明显增强 ＲＥＳ 吞噬功能，中、小剂量组无显著性差异。结论：制何首乌浓度为２ｇ／ ｍｌ 时可显著提高实验小鼠非特异性免疫功能，具有扶正固本的作用。
关键词：廓清；网状内皮系统；制何首乌；吞噬
中 药 何 首 乌 为 蓼 科 植 物 何 首 乌 Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ Ｔｈｕｎｂ 的 干燥 块根，别名 首 乌，赤首乌 ［１ ］ 。近几年来对何首乌的免疫研究也逐渐被人们重视起来。本试验旨在探求制何首乌不同浓度何首乌水煎浓缩液对小鼠免疫调节作用的影响，为临床更好的应用此药提供参考依据。
１ 材 料
１．１ 动物
昆明小鼠４０只，体重２０２ｇ ，雌雄各半，购于中国医学院动物实验中心，动物合格证号： ＳＣＸＫ （军）－２００７－００７ 。
１．２ 药材
选用陕西安康的野生何首乌，按照中国药典２００５版 Ⅰ 部制何首乌标准进行炮制。
１．３ 主要仪器
灌胃器，０．２５ｍＬ 注射器， ４号针头，毛细管，微量进样器，紫外分光光度计（ ＵＶ２１０２ ），电子天平（ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＢＴ２２４Ｓ ），印 度墨汁，生 理 盐 水， ０．１％Ｎａ２ＣＯ ３ 溶液。
２ 方法
２．１ 制何首乌药液的制备
制何首乌饮片第一遍加６倍量的水，浸泡１小时，煎煮１小时；第二遍加４倍量的水，煎煮１小时，合并煎液，浓缩至含生药２ｇ／ ｍＬ （大剂量），定容，密封后放于４℃冰箱保存。用时以此浓度作为何首乌大剂量，后依次稀释至１ｇ／ ｍＬ （中剂量）、０．５ｇ／ ｍＬ（小剂量）。
２．２ 实验方法
小鼠按体重随机分为４组，即对照组和制何首乌大、中、小剂量组，分笼饲养，每组１０只。对照组给予等体积的冷开水，给药组剂量分别为１０ 、 ２０ 、 ４０ｇ／ｋｇ （分别相当于成人日用量的５０、１００ 、 ２００倍）。给药体积为０．２ｍＬ ／ １０ｇ 体重。每日灌胃一次，每４天称体重一次，根据体重调整给药容积。每天下午２：００～３ ： ００给药，连续给药１２ｄ 。最后一次给药后２４ｈ ，给小鼠于尾静脉注入被稀释的印度墨汁０．１ｍｇ／ １０ｇ 。用取血吸管从小鼠眼眶后静脉丛取血０．０２５ｍＬ ，在注入墨汁后３０ｓ及６ｍｉｎ 。取血后，立刻吹入２ｍＬ ０．１％Ｎａ ２ ＣＯ ３ 液中，吸管于该液中反复吸入、吹出数次，以充分洗出被附着在吸管壁上的血液，取血完毕。再取０．０２５ｍＬ正常小鼠血，将其溶于０．１％Ｎａ ２ ＣＯ ３ 液２ｍＬ中校零，在分光光度计上于６７５ｎｍ 处比色，按下式计算吞噬指数 Ｋ和吞噬系数 α ， Ｋ ＝ （ｌｇＣ １ ＋ｌｇ Ｃ ２ ）／（ Ｔ １ － Ｔ ２ ）和α ＝ Ｗ３槡 Ｋ ／ ＷＬＳ （ Ｔ 为时间， Ｃ 为血中炭粒浓度，ＷＬＳ 为肝脾合重， Ｗ 为体重）。
２．３ 统计方法
所有数据应用 ＳＰＳＳ１３．０ 软件进行统计学处理，采用均数±标准差（ｘ±ｓ ）表示。采用ＳＮＫ－ｑ检验进行组间两两比较，并用完全随机设计的方差分析进行比较。
３ 结 果
结果显示大剂量组 ＲＥＳ吞噬功能显著增强（ｐ＜０．０５ ），中、小剂量组无显著性差异（ｐ ＞０．０５ ）。提示浓度为２ｇ／ ｍＬ制何首乌药液具有提高机体非特异性免疫功能（详见表１ ）。表 １ 制何首乌对小鼠 ＲＥＳ 吞噬功能的影响
剂量浓度（ｇ／ ｍＬ ） 动物数
（只）
吞噬指数
（ Ｋ ）
吞噬系数
（
α ）
ｐ
大剂量
２
１０ ０．１０３２±０．０２７９ １１．７１±１．０３ ＜０．０５
中剂量
１
１０ ０．０７１９±０．０３３１ ８．７２±０．７８ ＞０．０５
小剂量 ０．５ １０ ０．０６８８±０．０２５０ ７．９６±１．０５ ＞０．０５
对照组
０
１０ ０．０４９０±０．０１７６ ８．１１±０．７３
注： ｐ 值为与对照组比较。
４ 讨 论
网状内皮系统（ ＲＥＳ ）具有强大而迅速地吞噬廓清异体颗粒或某些可溶性异物的能力，并能迅速清除体内自身产生的某些有害物质，它是机体最重要的防御系统。当静脉注入特定大小的惰性炭粒后，它即可被 ＲＥＳ细胞迅速吞噬而从血流中廓清。因此，可借助测定血流中炭粒的消失速度来反映ＲＥＳ吞噬异物的能力 ［３ ］ 。制何首乌具有补肝肾，益精血之功，为临床常用补益之品，主要用于精血不足所致的头晕目眩、齿摇骨软、发白早衰等 ［２ ］ 。现代药理实验证明，何首乌还能延缓老年大鼠胸腺年龄性退化，并能促进老龄小鼠胸腺超微结构明显逆转变化增加蛋白质和胸腺核酸水平，使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显上升，从而提高机体非特异性免疫功能 ［４ ］ 。本实验证明，浓度为２ｇ／ ｍＬ制何首乌药液具有增强小鼠网状内皮系统对血流中惰性炭粒的吞噬功能，为临床应用提供了实验基础。
参考文献：
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