稳定细胞株构建---高产细胞株的秘密

CHO和骨髓瘤细胞是构建稳定细胞株最常用的两种宿主细胞。基本上用这两类细胞生产的治疗性蛋白都能分泌到细胞外，从而可以从细胞培养液中收获产物。CHO细胞属于成纤维细胞，是一种非分泌型细胞，它本身很少分泌内源蛋白。

科研人员在蛋白组学和转录组学水平上研究了B细胞变成浆细胞所发生的生理变化。细胞转变提高了能量代谢水平，改善了蛋白分泌和糖基化能力，同时增加了氧化还原水平用来应对活性氧的影响。B细胞或浆细胞的基因组中只有一个功能性的免疫球蛋白基因。在B细胞成熟的过程中，二倍体细胞中其中一个等位基因发生失活。但是，仅仅是免疫球蛋白基因的一个拷贝足以使浆细胞成为一个高产的分泌细胞。因此，只需将目的基因的一个拷贝整合到杂交瘤细胞基因组适合的位置就可以使其成为分泌外源蛋白的强大细胞。与瘤细胞不同，CHO必须经过改造后才能提升蛋白表达能力。

除了蛋白表达能力之外，优秀的细胞株还应具备良好的生长和代谢特性。在过去的十多年里，大量转录组学和蛋白组学的研究致力于揭示高产细胞株的特性。人们逐渐意识到没有那一种主要的调控因素能使CHO或NS0来源的重组细胞变成高产细胞株。高产细胞株的形成涉及细胞内许多通路的改变，比如代谢、分泌、氧化还原平衡和生长/死亡调控；更可能的是大量基因表达水平的微小变化，而不是几个主要节点的大变化。