组织学教学标本制作 基膜

基膜

表皮铺片显示细胞基膜染色法

⑴取大白鼠、豚鼠耳壳皮肤及人腹部皮肤（尽量少要皮下组织），置入EDTA液37℃处理60~90分钟，在解剖显微镜下小心分离表皮，选择其中平整完好的表皮进行铺片、染色。

⑵将表皮放入0.2M Tris（三羟甲基氨基甲烷，(hydroxymethyl)aminoethane）顺丁烯二酸（马来酸，Maleic acid）缓冲液（pH7.3)4℃浸洗15~30分钟。

A液（0.2M Tris顺丁烯二酸）：Tris（分子量121）2.42克溶于蒸馏水100毫升

B液（0.2M顺丁烯二酸):顺丁烯二酸（分子 量116）2.32克溶于蒸馏水100毫升

C液（0.2M氢氧化钠）：氢氧化钠（分子量40）8克溶于蒸馏水100毫升

pH7.4：A 25毫升  B  27毫升 C  48毫升

⑶入4%CaCodylate（二甲胂酸）缓冲液（pH7.3)4C固定20~30分钟。

⑷入Tris顺丁烯二酸缓冲液（以6.55%蔗糖配制）（pH7.3)4C浸洗20~30分钟，换液一次。

⑸入ATP孵育液37C 10~20分钟

孵育液：ATP 10毫克（新生婴儿15毫克），5%硫酸镁水溶液1.5毫升，2%顺丁烯二酸(pH7.3)10.4毫升（用8.85%蔗糖配制）

⑹Tris顺丁烯二酸缓冲液1~2分钟 。

⑺2%硫化氢水溶液显色1分钟。

⑻Tris顺丁烯二酸缓冲液换洗三次。

⑼将表皮基膜表面朝上，用甘油明胶或PVP封片。

结果：

细胞基膜呈黑色阳性反应。