单细胞测序探究小鼠心脏的动态变化
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摘要
本文主要使用了10x Genomics ,测了超过30,000个细胞,重点发现了一种新的成纤维细胞的亚型,可能在心脏损伤后修复的不同方面具有一定作用。
上游处理
用cellrange进行的上游分析,关键参数如图所示:
文章中对Pdgfra-GFP+标记的 fibroblast进行了进一步的单细胞测序,总共捕获了16,787个细胞
质量控制情况
10x Genomics 通过质控,最终保留了13,331个细胞的profile(其中sham: 5,723,MI-day 3: 3,875,MI-day 7: 3,733)
Fluidigm data
如何挑选重要的基因和降维
使用Seurat R 包进行聚类和降维,就是用的seurat官方教程的步骤进行分析,没有指明特别更改了哪些参数
降维后的聚类及对每个类的注释
如图:具体分类用的marker文章中有详细描述,这里就不赘述了
其他分析
个人以为以下的1,2两个分析是这篇文章的亮点,图真是漂亮,有兴趣的可以去原文看详细的描述,代码文章也给出了。不说了,我要去观摩学习了~
1.用于检测细胞群动态的微分比例分析 (differential proportion analysis; DPA)
2.TIP中的细胞 - 细胞通讯分析(Cell-cell communication analysis)
3.Cell trajectory analysis
总结
这篇文章通过检测total interstitial population (TIP) 和flow-sorted Pdgra-GFP+CD31- fibroblast lineage cells单细胞数据,十分清楚的发现了心脏在不同细胞群之间具有大量的非动力学。个人认为很有启发性的地方是DPA分析,对于研究动态变化给了一个新的方法