胎盘间充质干细胞的新用途 ——肝纤维化的治疗

@Dr.博（ID:bestboyalife）

作者：石桂来博士

肝纤维化(liver fibrosis)是一种常见的慢性进行性肝病，由多种原因（病毒、酒精、寄生虫、自体免疫反应、药物等）引起，病理表现为肝内细胞外间质成分异常沉积，并影响肝脏的功能。

肝移植是目前公认的最有效的治疗手段，但捐献的肝脏数量严重不足，因此需要研究其他的治疗手段。

胎盘间充质干细胞（placental mesenchymal stem cells，pMSCs）是从胎盘组织提取的一种多能干细胞，在临床上有广阔的应用前景，包括急性肝损伤、糖尿病足、下肢缺血、子痫前期、放射性肠病、自体免疫疾病、骨关节炎、早衰症等疾病的治疗。

近日，来自浙江大学附属第一医院的研究团队发现胎盘间充质干细胞可以治疗肝纤维化，相关结果发表在国际期刊《Stem Cells International》上1。

该团队首先构建肝纤维化的动物模型。

他们选取6周龄的SD雄性大鼠，皮下注射CCl4（和橄榄油1：1混合，0.5ml/100g），每周2次，持续8周，以构建肝纤维化模型。

接下来他们将肝纤维化大鼠分成两组，每组24只，其中一组通过尾静脉注射2*10^6个胎盘间充质干细胞（重悬在1ml生理盐水中），另一组只注射生理盐水，并于注射后1、4、8、12周对肝脏组织和血清进行分析。同时，他们选择健康大鼠作为对照。

该团队通过H&E和Masson三色染色法鉴定肝脏组织结构。结果显示，胎盘间充质干细胞治疗组肝脏组织的染色程度更深，可以观察到再生的肝结节，并且纤维隔间的胶原含量减少。

天狼星红染色的结果进一步证实了肝脏组织胶原含量的变化。这种现象在治疗8周后尤为明显，并在12周后肝脏组织基本恢复正常。另外，和未经治疗组相比，胎盘间充质干细胞治疗组肝纤维化大鼠的Laennec纤维化评分系统得分更低。

肝脏弹性成像的结果显示胎盘间充质干细胞治疗可以降低肝脏的硬度。因此，胎盘间充质干细胞治疗可以改善纤维化肝脏的组织形态和硬度。

接下来，他们通过血清生化分析评估肝纤维化大鼠的肝功能恢复情况。结果显示，胎盘间充质干细胞治疗组的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、结合胆红素（DBIL）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）、碱性磷酸酶（ALP）均降低，而白蛋白的含量上升，到12周时恢复至正常水平。另外，层粘连蛋白和透明质酸（肝纤维化指标）的含量在pMSCs组均降低。因此，pMSCs治疗可以改善纤维化肝脏的功能，缓解病理症状。

间充质干细胞具有分化为肝脏细胞的潜能。为了证实这一点，该团队将注射的pMSCs通过慢病毒载体标记上绿色荧光蛋白，并在荧光显微镜下观察肝脏组织。结果显示，注射胎盘间充质干细胞12周后的肝脏组织中仍然能观察到标记细胞的信号。另外，他们通过PCR和免疫组化实验分析肝脏细胞的分子标志物（ALB, AFP和CK18），结果显示，除了注射后1周组，在注射胎盘间充质干细胞 4、8和12周后的大鼠肝脏中均能观察到人源肝脏细胞。

研究表明，肝星状细胞的激活跟肝纤维化的发生密切相关。最后，该团队通过PCR和免疫组化实验分析了肝星状细胞激活的分子标志物（α-SMA和TGF-β1），结果显示胎盘间充质干细胞治疗组α-SMA和TGF-β1的含量显著降低。因此，胎盘间充质干细胞可以通过分化成肝脏细胞、抑制肝星状细胞激活等机制起到治疗肝纤维化的作用。

随着国际上对胎盘干细胞关注度的提高，国内一些机构也在开展胎盘干细胞的存储服务及临床研究，博雅干细胞是其中之一。博雅干细胞库是全球首家通过胎盘间充质干细胞AABB认证的干细胞库。另外，博雅正在同国内多家医院合作，开展胎盘干细胞治疗自体免疫疾病、骨关节炎、宫腔粘连、地中海贫血、早衰症等疾病的临床研究。博雅正在和国内外同行一起，探索胎盘干细胞的临床应用潜力，并造福人类。

参考文献

Yu et al. Therapeutic Effect and Location of GFP-Labeled Placental Mesenchymal Stem Cells on Hepatic Fibrosis in Rats. Stem Cells Int. 2017; 2017:1798260.