FGF21基因敲除小鼠模型造模方法

通过构建靶向敲除FGF21基因的载体，研究FGF21对毛囊发育及生长周期的影响及作用机制。

利用美国麻省理工学院CRISPR Design软件设计筛选得到4个g RNA，体外完成FGF21-g RNA和Cas9 mRNA转录，然后将FGF21-g RNA和Cas9 mRNA混合取25 ng/μL FGF21-g RNA 20μL和100 ng/μL Cas9 m RNA 10μL混匀, 加入3 mol/L乙酸钠，p H值调至5.2, 用无水乙醇沉淀后再用无酶水重悬。通过显微注射法将混合物注射到小鼠受精卵胞质中, 将存活的受精卵移植到假孕受体母鼠内, 至母鼠生产获得首建鼠F0代。