CRISPR/Cas9斑马鱼基因敲除/敲入模型构建

1.CRISPR/Cas9斑马鱼基因敲除模型构建

CRISPR/Cas9靶向基因敲除技术是最新发展起来的强有力的基因组编辑分子生物学工具,现已广泛应用于细胞系、小鼠、斑马鱼等多个模式生物体系。仁源生物吸收并改进了这一技术,可高效快速地在斑马鱼系统中实现目标基因的定点敲除,为研究目标基因及利用构建的定点敲除的转基因斑马鱼提供有力工具。

2.CRISPR/Cas9斑马鱼基因敲入模型

CRISPR/Cas9基因敲入技术可为目标基因的研究提供更有力的工具,不仅适合研究目标基因的功能,更可研究目标基因的不同突变体、不同转录本提供了更有效的基础,同时可实现特定细胞的荧光标记,可以预期,CRISPR/Cas9基因敲入技术可在未来研究中发挥重要的作用。

3.Tol2斑马鱼基因敲入模型

Tol2转坐酶介导的斑马鱼基因敲入技术,是最高效的基因敲入技术。选择合适的Promoter,利用这一技术可最有效地构建斑马鱼目标基因敲入模型。

斑马鱼基因功能分析

1.   斑马鱼目标基因的基本分析:通过对斑马鱼整体或切片的原位杂交、免疫组化,可对该目标基因的在不同时相的表达组织特异性进行基本分析;

2.   斑马鱼目标基因的过表达和分析:显微注射体外合成的目标基因野生型或突变型mRNA是高效分析目标基因功能的重要手段;

3.   斑马鱼目标基因表达的抑制和分析:设计、合成、注射目标基因特异的修饰寡聚核苷酸可高效分析目标基因的功能;

4.   利用斑马鱼系统可对小分子化合物、药物的生理活性、药理或毒理进行快速分析

5.   斑马鱼行为分析是分析评估神经精神系统功能的有力工具,可研究基因等内源因素、或药物等环境因素对神经精神系统的影响和作用

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