甲胺磷、乙酰甲胺磷、乙酰胺HPLC检测方法分享

甲胺磷（Methamidophos），是一种有机磷化合物，通常用作农药，在台湾的商品名为达马松、在中国大陆的商品名为多灭灵。由于毒性强，在日本等部分国家已禁用，中国大陆从2008年起亦公告停止生产及使用。

甲胺磷结构式

乙酰甲胺磷（Acephate），又名高灭磷，是一种低毒口服杀虫剂。具有胃毒和触杀作用，并可杀卵，有一定的熏蒸作用，是缓效型杀虫剂。在施药后初效作用缓慢，2-3天后效果显著，后效作用强，适用于蔬菜、茶叶、烟草、果树、棉花、水稻、小麦、油菜等作物，能防治多种咀嚼式、刺吸式口器害虫和害螨。保管及使用不当可引起人畜中毒。[1]

乙酰甲胺磷结构式

根据中华人民共和国农业部公告第2552号，自2019年8月1日起禁止在蔬菜、瓜果、茶叶、菌类和中草药材作物上使用乙酰甲胺磷（包括含其有效成分的单剂、复配制剂）。 [2]

同时，乙酰甲胺磷在使用过程中会降解并产生毒性更大的甲胺磷,存在较大的质量安全隐患。监管过程中，乙酰甲胺磷和甲胺磷同时检出或超标的情况时有发生，但由于乙酰甲胺磷及其代谢物甲胺磷在蔬菜上的降解动态规律不明确，查处缺乏技术依据，难以判定是违规使用乙酰甲胺磷还是违法使用甲胺磷，给监管带来极大难度。

目前气相色谱法检测乙酰甲胺磷和甲胺磷的方法存在较明显的基质效应影响，同时存在色谱图峰形较宽，拖尾和进样口吸附等问题，准确度低。而HPLC检测方法更为稳定，可避免以上问题。以下为弗顿开发出的HPLC检测方法：

甲胺磷、乙酰甲胺磷、乙酰胺HPLC检测方法

色谱条件：

试剂：弗顿HPLC乙腈、弗顿HPLC水

色谱柱：HiSep HILIC-A（250×4.6mm i.d.,5um）

流动相：ACN/H2O=95/5（v/v）

柱   温: 30 ℃

检测波长：225 nm

流   速：1 mL/min

进样量：10 uL

样品配制： 

对照品溶液：分别精密称取甲胺磷、乙酰甲胺磷、乙酰胺对照品适量，加乙腈溶解稀释成0.1 ppm即得。

供试品溶液：将经过处理的样品用乙腈溶解稀释成1 ppm即得。

结论：

1.弗顿乙腈空白基线平稳，且无干扰峰，极大提高了分析方法的准确度。

2.甲胺磷、乙酰甲胺磷和乙酰胺分子结构中含有极性较大的酰胺基官能团，这类极性分子化合物的分离，常规的疏水作用机理不能达到理想的分离效果；本方法采用亲水作用模式，增强了极性分子的保留，极大提高了分离度，且峰形尖锐对称，实现了甲胺磷、乙酰甲胺磷和乙酰胺良好的分离。

参考文献：

1.Ziqiu Lin 1 2, Shimei Pang 1 2, Wenping Zhang 1 2, Sandhya Mishra 1 2, Pankaj Bhatt 1 2, Shaohua Chen 1 2; Degradation of Acephate and Its Intermediate Methamidophos: Mechanisms and Biochemical Pathways; Front Microbiol 2020 Aug 18;11:2045.

2.中华人民共和国农业部公告 第2552号