诱导表达模型细胞稳转株构建技术原理
采用Tet-on系统进行诱导表达目的基因,虽然可以直接进行质粒瞬转,该类载体的慢病毒包装以构建相关的稳转细胞株。构建好的Tet-On系统细胞株同时表达tTS和rtTA两种转录调控因子,而目的基因的表达可受四环素调控。
其中tTS在四环素不存在的情况下会结合目的基因的上游TRE启动子,抑制目的基因表达。在细胞体系中添加四环素或其类似物后,rtTA进行响应并结合TRE启动子,激活目的基因表达。
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