组织学教学切片制作 （一） 取材专题
一、动物选择以人的材料较理想，但某些组织结构，动物比人的典型，如猪肝比人肝肝小叶清楚，胰岛细胞用豚鼠胰腺观察，豚鼠内耳作内耳柯蒂器切片，兔皮下组织和肠系膜作活体染料注射和单层扁平上皮镀银法，运动终板用猫肋间肌或壁虎尾肌等。再说，人的材料相对来说比较困难，常用动物代替。常用的动物的：猴、狗、猫、猪、牛、羊、兔、豚鼠、大白鼠、小白鼠等。表一 动物取材猴神经系统、循环系统、免疫系统、内分泌系统、泌尿系统 、生殖系统、特殊感觉器官等狗呼吸系统、循环系统、神经系统、内分泌系统、免疫系统、泌尿系统、雄性生殖系统、消化系统部分器官、卵巢等猫消化系统、泌尿系统、内分泌系统、神经系统、肌组织等兔皮下组织、肠系膜、卵巢、肺、耳廓羊心脏、膀胱、雌性生殖系统等猪肝脏、骨髓、脑垂体等豚鼠胰腺、内耳、肾上腺等表二 动物器官取材动物组织备注猴肝、脾、肾、胰、大脑、小脑、脊髓、脊神经节、有髓鞘神经、交感神经节、气管、大动脉、大静脉、中动脉、中静脉、小动脉、小静脉、淋巴结、输尿管、膀胱、肾脏、子宫、卵巢、输卵管、乳腺、输精管、前列腺、食管、胃、十二指肠、结肠、甲状腺、肾上腺、脑垂体、松果体、眼球、掌皮、内耳、鼻腔、喉、骨骼肌、腮腺、颌下腺狗食管、结肠、胆囊、舌、喉、声带、扁桃体、淋巴结、脾、心脏、大动脉、大静脉、中动脉、中静脉、小动脉、小静脉、肺、气管、输尿管、膀胱、输精管、甲状腺、周围神经（坐骨神经）、脊神经节、颌下腺、眼球、胃贲门、胃幽门、直肠肛门交界、鼻黏膜（嗅觉细胞）以小狗（出生三个月）为好猫肝、胃、十二指肠、空肠、回肠、肾、肾上腺、脑垂体、卵巢、大脑、小脑、脊髓、脊神经节、交感神经节、周围神经、运动神经末梢（肋间肌）、骨骼肌、平滑肌、掌皮兔疏松结缔组织（皮下组织）、肠系膜、卵巢、睾丸、肺、耳廓（弹性软骨）、回肠（潘氏细胞）豚鼠胰腺（胰岛细胞）、肾上腺、内耳、小肠（嗜银细胞）羊心肌、心传导系统、子宫、宫颈、乳腺猪肝脏（肝小叶）、骨髓、脑垂体、胆囊、脾脏大白鼠皮下组织肥大细胞）、小肠（潘氏细胞）、嘴唇（毛囊游离神经末梢）尽量使用人的材料：骨发生、血液、骨髓、胸腺、阑尾、头皮、体皮、掌皮、眼球、子宫、宫颈、乳腺、纤维软骨、肌腱等。二、取材方法先取腹腔内的器官组织：先取肝脏、胆囊，其次取胃、肾上腺，再取胰腺、脾、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠等然后取胸腔及贫腔内的器官组织最后取神经系统先对该器官组织作大体检查，是否正常，有无病变等。
（一）肌组织分三种：平滑肌、骨骼肌、心肌1.平滑肌 分布于内脏器官姻胃、肠、膀胱、子宫等组织中2.心肌 分布于心脏3.骨骼肌 分布于骨骼上。舌肌和食管上段为横纹肌。骨骼肌取舌肌和肋间肌最理想，也可取胸锁乳突肌、缝匠肌。取材时，注意防止因肌纤维收缩引起变化。故固定前，将肌肉纵切一条，两产用线结扎，将结扎两产分别绑在一个自制的弓形玻璃棒上，使肌肉呈直状，再入固定液固定。可避免肌肉收缩引起的纤维形态改变。骨骼肌切片应取纵、横两个切面。（二）消化系统1.肝脏大体检查肝脏有无脂肪充性、充血、寄生虫、肝硬化、肿瘤等。肝分左右四叶。一般取肝脏右前叶或左外叶中部作纵切或冠状切面，再切成小块分别投入固定液固定。动物肝脏特别注意肝寄生虫及胆管扩大等情况。肝脏易于脂变。肝取材不宜过大，因细胞密集，过大则固定液不易迅速渗入组织内，一般 2~3毫米左右。2.胆囊先将胆囊与肝脏分离。用无齿镊挟起胆囊，用小刀或剪刀细心地将胆囊与肝脏分离，从一侧将胆囊剪开，倒掉胆汁，用生理盐水充分洗净，然后取材。不要取贴附于肝脏的一面，可在游离面胆囊体部作一纵切面，以字膜面贴附于滤纸上，再固定。另外，也可直接在胆囊游离面体部取材，取下胆囊立即附贴于滤纸上，再放生理盐水充分洗去胆汁，投入固定液固定，不要让镊子损伤胆囊黏膜。
3.胰腺分胰头、胰体、胰尾三部分。胰尾的胰岛较多一般取胰腺的尾部横切，应注意将胰腺周围的脂肪组织去掉，以免影响胰腺组织固定。胰腺因含多种消化酶而易于自溶，故取材要快。保持新鲜，组织块小，避免自溶变性。4.食管选用人或猴或猴食管。其上三分之一段为骨骼肌，下三分之为平滑肌，中三分之一段为骨骼肌与平滑肌。下三分之一段食管腺较丰富。取下三分之一段作整体横断面，注意保持其黏膜和外膜，防止因组织收缩而变形，要在食管腔内插一圆形击棒再固定，保持食管充盈。5.胃分贲门、底部、体部和幽门部。胃充盈时皱襞减少乃至消失。一般取空虚为好。如胃内有食物，先用生理盐水洗净，再检查胃黏膜是否有充血、溃疡等情况。胃溃疡多见于近幽门部的小弯处。胃黏膜正常呈灰白色。取材时在胃底或胃体部作一纵切面，因胃腺主要分布于胃底和胃体。组织取出后，洗去胃内的食物残渣，放在滤纸上铺开，防止卷缩，投入固定液固定。6.十二指肠人的十二指肠长25厘米，呈C形，分球部、降部、水平部和升部四部分。一般取降部和水平部。取降部时，应避开胆总管和胰管开口处。十二指肠在剖取时可引起肌层剧烈收缩，黏膜外翻而变形，故取材时可用注射法固定。先将所取部分两端结扎，再注射固定液，量不宜过多，注射后全部投入固定液固定4~6小时，再取材。取材时先除去两端的结扎部分，将十二指肠作横切面，浸入固定液再固定24小时。
7.空肠(略)8.回肠回肠上接空肠，下与盲肠交界。回肠有集合淋巴结。取材时应切取有淋巴结的回肠部分，作横切或纵切。用生理盐水洗去肠腔内容物，再固定。9.结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠四部分。前三部分在腹腔中形成倒U形。一般取横结肠和降结肠纵切面，取出结肠，先在生理盐水洗去粪便。为防止肌层收缩，可附贴在滤纸上，投入固定液固定。
10.阑尾（蚓突）根部连与盲肠的内后壁，一般长5~10厘米。一般取人的阑尾。（病理解剖或外科手术）先检查有无阑尾炎，有无充血、水肿等情况。可在阑尾中部作横切面，洗净阑尾腔中的内容物，再固定。(三）泌尿系统1.肾脏 肾组织易出现蛋白质变性、混浊肿胀和脂肪变，有时出现肾小管自溶等情况。取材和固定是关键。取材前，先检查肾脏外形，肾各部质地是否一致，被膜是否黏连、有无坚硬和囊样区域。肾取材有两种方法。一是先从肾脏注射固定液，然后再取材。固定液从肾动脉注入，同时切断肾静脉，使固定液注入的同时肾血液随之排出，不致使肾脏内部管道扩张而影响肾脏原有形态。固定液注射后，连同全肾投入固定液固定2~4小时，再剖开肾脏切取小块组织。二是取出肾脏，保护肾被膜，沿肾外侧缘（凸面）中部直到深部作纵剖面，将肾切成两半，然后在肾件一半再作扇形切面，应切三通皮质和髓质。切取小块组织后，直接入固定液固定24小时，再按常规处理。
2.输尿管上八分子二只有内纵、外环两层。下八分之一有三层（增加外纵层）。一般取输尿管下分之一段，作整体横切面。3.膀胱应注意生理情况。膀膛充盈（扩张）时，膀胱上皮只有2~3层细胞；膀胱空虚（收缩）时上皮有8~10层。以收缩期为主。一般取收缩时的膀胱组织。取材时，沿膀胱前壁正中线切开，在膀胱体部作纵切面。切取膀胱组织时引进膀胱平滑肌收缩，可将其附贴在滤纸上，然后再固定。
腹部器官取完后，再打开胸腔取材。开胸腔应用软骨刀，在胸骨两侧肋软骨与硬骨嫌接处切开，注意刀尖不要切破下面的肺。肋骨发断后，提取肋骨弓，将胸锁关节用解剖刀自后部剖开，把切除的胸骨和肋骨全部拿掉，露出胸腔，再取材。（四）呼吸系统1.肺位于胸腔，左肺两叶，右肺三叶。应取肺小叶中部作横断面。能全面看到肺内小支气管、细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气管、肺泡囊、肺泡管、肺泡等结构。肺内有空气，固定液难以渗入，脱水 较困难。可用注射法固定，由肺支气管或肺动脉注射固定液。从支气管注射时，一定要慢，量不宜多。过急过量都会使呼吸性细支气管和肺泡破裂，将肺投入固定液固定6~12小时后切成小块。肺的脱水、透明比一般组织长，可高于2~3倍。以肺沉于溶液中为度。取材前，应观察肺的大体情况，是否充血，有无肺气肿、肺脓肿、播散型肺结核及且黏连等情况，肺组织正常方能取材。
2.气管(略)（五）循环系统1.心脏先剪开心包膜，用在手持心脏，将上腔静脉与下腔静脉分别切断，再将肺动脉和肺静脉在距瓣膜3厘米处切断，并将主动脉在离主动脉瓣4厘米处切断，取出心脏，取左心室。先用解剖刀在左、右肺静脉入口之间与左心房联系起来作一直线，沿心脏左缘至心尖部切开，再由心尖部沿心室中隔平行线切开左心室的前壁和主动脉。一般取左心室乳头肌部位，沿乳头肌长轴作纵切面，在乳头肌上有较丰富的浦肯野纤维。若观察心脏传导系统，可取窦房结和房室结。窦房结位于心脏的上腔静脉入口和右心耳连结处，在该部取材作纵切。须切入深部才能看到窦房结。房室结在左心房的心内膜下，恰在三尖附着处。
2.动脉和静脉一般作 横切面。大动脉和大静脉：取主动脉和上腔静脉或下腔静脉中等动静脉：取肱动静脉、股动静脉及尺动静脉并行支小动脉：直径在1毫米以下。较大的动脉或静脉外膜都有小动脉，各器官都有。（六）免疫系统1.胸腺一般用人的胸腺。胸腺位于胸腔纵隔内，形状大小随年龄而异。应取初生儿胸腺。年龄增长，其胸腺逐步退化。2 淋巴结为大小不等的扁圆形、卵圆形或豆形器官，质柔软，正常时为灰白色。一般取肠系膜淋巴结、髂内淋巴结和颈部淋巴结。作纵切面，固定时切开，否则固定液不易渗入髓质中央。3 脾脏新鲜脾脏呈暗红色。注意脾形状和大小，被膜有无增厚和黏连情况，白髓是否明显。取材时先用生理盐水从脾动脉注射冲洗，同时切断脾静脉。必要时切开脾脏两端，以便其内部血液迅速被冲洗出来。用生理盐水充分将脾内血液冲净至脾脏呈灰白色，可清晰显示脾索和脾窦。横切面，按常规方法固定。
（七）生殖系统
1 子宫子宫为梨形肌性器官，上宽下窄，分四部分：输卵管以上凸起部子宫底；底部下较宽大的部分为子宫体；再下段狭窄，呈圆柱形为宫颈。取材：自宫颈至子宫体中心部前壁正中切开，再分别向两侧乾输卵管对角方向切至子宫左右角，即输卵管相连处，整个发口呈Y字形。打开子宫后，先检查子宫内膜是否平滑、有无肿瘤]有无出血和其它物质。宫内膜与宫颈黏膜分界是否清楚。取子宫体前壁部分纵切。包括子宫内膜、肌层和外膜全部。宫颈一般作矢状切面。2.输卵管一般在输卵管壶腹部或峡部作横切面。注意检查管腔是否肿大、有无内容物。如有病变则不能用。3.睾丸人的睾丸过大,难于作整体切片.一般用猴\兔或大小白鼠睾丸.从外侧缘切下,直到切到附睾及睾丸输出小管,分成两半,然后固定。睾丸整体固定效果不太好。也可用注射法固定。由睾丸动脉注射固定液，切断睾丸静脉。注射后继续在固定液中固定。（八）神经系统神经系统包括中枢神经系统和周围神经系统。中枢神经系统包括脑和骨髓。周围神经系统包括脑神经、脊神经和植物性神经。1.脊髓
脊髓上端与延髓连接，下端渐尖呈圆形终止于尾椎。脊髓有两个膨大部：颈膨大和腰膨大。取材：先在背部自枕同突起沿锥骨棘突一侧至骶骨止作一长切口，剥离背棘上的软组织及椎弓上的骨膜等。用骨锯锯开两侧椎弓，将棘骨和椎板用骨剪一一钳掉，露出脊髓。取毛植物石膨大部分作横切面，并连同双侧的脊神经节取下，平放在滤纸上再固定。2 神经纤维有髓神经纤维取材，一般取坐骨神经和股神经。取其绷、横切面，因神经纤维切断时收缩变形，故在固定前，将神经两端用丝线扡起来，将结扎的两端分别绑在一个自制的弓形玻璃棒上，固定好后再将神经从弓形玻璃棒取下冲洗。3 大脑和小脑
先用骨锯锯开颅骨，锯时不要伤及脑组织。取下颅盖，露出硬脑膜。用剪刀沿正中线矢状窦剪开，将硬脑膜完全除掉。取脑时可用左手四指插入额叶与颅骨之间，把额部脑组织向后抬起，露出嗅神经和视神经，切断视神经，颈内动脉和中脑漏斗，将整个大脑向后托起，蒋用刀尖或剪刀割开小脑慕䥥。为防止大、小脑向外下垂，可用在手将其托起，轻轻向后拉出。然后对各对脑神经切断，再用解剖刀伸入枕骨大孔内切断脊髓，随即将完整的大、小脑从颅出取出。取材时，用切脑刀或刀片，取大脑组织一般是切取大脑半球中央前回和中央后回部分，作冠状切面。将大脑组织切为小块，平放在滤纸上，再固定，防止变形。小脑取材可在小脑蚓部作纵切面。延脑和桥脑可作横切面取材。（九）感觉器官1.眼球眼球外部为眼球壁，内部为屈光装置。整体取材：摘除眼球时细心剥离眼眶内与眼球联接组织，切勿伤及眼球壁，眼球视神经保留5毫米左右，切断视神经将眼球取出。将固定液从后房注入，也可由颈动脉注入，量不宜太多，至眼球壁稍扩张即可。眼球组织必须新鲜，否则视网膜易剥离。眼球体积较大，巩膜系致密结缔组织，眼后方充满玻璃体，有的组织很脆硬，如晶状体经固定脱水后质地变硬变脆，内部构造较细微，制片产困难。一般用火棉胶切片。眼球脱水至0%酒精后，在眼球壁两对侧打开两个小窗口，让脱水剂和火棉胶充分浸透。
2.内耳一般选用豚鼠内耳：易于取材；且结构较典型，适用制作教学标本。内耳由骨迷路和膜迷路组成。前庭和半规管的𣬰迷路内有位觉器。耳蜗膜迷路内有听觉感受器即Corti器。取材地应将整个内耳取下，用注射法固定，将整个内耳投入固定液 固定。一般平外耳道水平切片，观察全部结构。切片时保留Cori器的完整 。