超级核酸酶使用方法与注意事项

1.超级核酸酶使用方法

1.1大肠杆菌或者其他细菌样本处理

细菌离心收集后，用10倍体积的TBS缓冲液重悬，菌体破碎后，每毫升菌体裂解液加入1-2微升超级核酸酶(若添加终浓度为5-10mM的Mg2+，则效果更佳)，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。

1.2细胞样本处理

1)贴壁细胞去除培养基，用PBS洗后，100微升RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。

2)悬浮细胞离心收集后，在离心管中加100微升RIPA裂解液(或其他哺乳动物细胞裂解液)加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。

1.3组织样本处理

将30-100毫克动物或者植物组织研磨充分后，加入100-200微升裂解液，同时加入加1-5微升超级核酸酶，室温孵育30分钟，收集裂解液，离心取上清即可进行下游实验。

2.超级核酸酶使用注意事项

1)避免使用磷酸盐缓冲液。

2)含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加酶的用量。

3)超级核酸酶有超强的试剂兼容性如:6M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4%Triton X-100，0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，100mM DTT，当超过该浓度时核酸酶活性会降低，可通过增加核酸酶量使活性得到补偿。