哺乳动物基因表达piggyBac载体

　　PiggyBac载体系统可以非常高效地把外源DNA插入哺乳动物细胞的基因组，该系统技术简单，可利用质粒转染（非病毒转导）把您所感兴趣的基因长期稳定地整合到靶细胞基因组。

　　该系统来源于piggyBac转座子，最开始在粉纹夜蛾（Trichoplusia ni） 中发现并分离而来。基于序列同源性分析，piggyBac转座子是许多常见物种共有的一类转座子。

　　PiggyBac系统包含两个载体，一个载体被称为辅助质粒，负责编码转座酶；另一个载体被称为转座子质粒，包含两个末端重复序列（TRs）以及两者之间的被转座区域，需要被转座到宿主基因组中的目的基因就克隆在这个区域。

　　当辅助质粒和转座子质粒共转染靶细胞时，辅助质粒产生的转座酶将会识别转座子的两个TR元件，然后将被转座区和两个TR元件插入到宿主基因组中。转座插入通常发生在包含TTAA序列的宿主染色体位点，并在转座子两侧出现TTAA重复序列。

　　PiggyBac属于II类转座子，通过“剪切—粘贴”的机制移动，从一个地方转座到另一个地方，而不留下序列本身（恰好相反，I类转座子是通过“复制—粘贴”的方式移动）。由于辅助质粒是通过瞬时转染进入宿主细胞的，故会逐渐丢失。随着辅助质粒的丢失，转座子在宿主基因组中变成了永久整合。当这些宿主细胞再次被辅助质粒转染，整合的转座子会再次通过“剪切—粘贴”的机制移动。