小鼠净化怎么做?
实验小鼠按照微生物质量控制程度可分为清洁级(Clean animal, CL)、无特定病原体级(Specific pathogen free animal, SPF)和无菌级(Germ free animal, GF)。作为微生物控制等级最高的无菌级是指用现有的技术在动物体内外均检不出任何微生物和寄生虫。那大家是不是特别想知道不同品系无菌鼠是怎么净化来的呢?下面就由我给大家带来:如何进行超级净化!
适宜的无菌环境
无菌环境是培育无菌鼠的重要前提。如何创造无菌环境呢?答案是消毒剂+隔离环境。
首先使用一定浓度的消毒剂能对隔离器内部进行完全的灭菌,依靠隔离器隔绝内外环境作用从而维持隔离器内的无菌。
有了无菌环境,无菌鼠怎么得到呢?
这就需要无菌超级净化了。目前超级净化有两种可行性操作:
1、以“胎盘屏障”为理论基础的剖腹产操作;
2、以“透明带作用”为理论基础的胚胎移植操作。
对比这两种操作的硬件需求和技术复杂程度,剖腹产操作更为适合。
适宜的SPF孕鼠
虽然“胎盘屏障”作用确保鼠妈妈肚子里的“小鼠宝宝”是最“干净”的,但想要获取子宫内的无菌小鼠,是不能让孕鼠自然生产的,除非是无菌鼠在无菌环境中生产,因此我们要人工“接生”。
对于“接生”我们一定要“三思而后行”,首先要确定是否可“接生”,我们需要通过雌鼠见栓日期或孕鼠“摸胎”进行判定。孕鼠“摸胎”不知道?这个我们之前有文章简单介绍过!简单总结:
小鼠在子宫中的体态:①头部朝向宫口;②身体及四肢舒展;③头及尾部手感略硬;
孕鼠状态:①有做窝行为;②被毛没有平时光滑柔顺。
剖腹产及代乳
将选取好的孕鼠进行安乐死,完整地取出子宫,此过程中需要注意子宫及血管操作时不可破损,同时子宫及血管截断前的密闭处理也是必不可少的。
接下来的操作就需要请出准备好的无菌“产房”——手术隔离器。取出的子宫,表面无菌处理后传入手术隔离器,整个过程要迅速且要有温度的维持,因为“鼠宝宝”是很怕冷的。在“产房”中我们将小仔从子宫中剥离出来,剪断脐带,刺激小鼠,使之能够自主呼吸,这样“鼠宝宝”就算抢救过来了。
问题来了,“鼠宝宝”没有“鼠妈妈”的喂养照顾如何成长呢?
有两种选择:1、给“鼠宝宝”找“无菌鼠奶妈”。2、技术员当“奶爸奶妈”。无论哪种选择都可以把我们需要品系的“鼠宝宝”饲育至离乳,不过相对于找带乳鼠,人工授乳操作难度大,更耗时耗力且离乳率不稳定。
以上所述就是无菌小鼠超级净化的基本流程了!理论上所有品系的小鼠均可以通过无菌净化变成无菌级的小鼠,作为肠道菌群相关研究“突飞猛进”的一年,无菌小鼠的时代已经来临,你的小鼠准备好了吗?