酶与它们的同工酶

酶与同工酶

在离开课本了一段时间后，我们还记得那些曾经熟悉的酶和它们的同工酶吗？我们再来温习一下吧，在工作中我们也应该知道它们的临床意义哦。。。。

一、天冬氨基转移酶及其同工酶

天冬氨酸氨基转移酶（AST），也称谷草转氨酶（GOT），AST催化天门冬氨酸和α-酮戊二酸的氨基转移作用，形成谷氨酸和草酰乙酸。

【组织分布】AST广泛分布于全身各组织，尤其以心脏、骨骼肌、肝脏和肾脏中最为丰富，AST有两种同工酶，分别存在于细胞质（ASTs）和线粒体（ASTm）中，肝脏中AST大部分（约70%）为ASTm。

【临床意义】AST在心肌细胞内含量较多，当心肌梗死时，血清中AST活力在发病后6~12小时之内显著增高，48小时达到高峰，约3~5天恢复正常。AST也是肝炎患者的观察指标，AST/ALT比值对于判断肝炎的转归有重要价值：急慢性肝病时AST/ALT比值＜1，常提示肝脏损害较轻，AST/ALT比值＞1，则提示肝脏损害较重。肝硬化和肝癌患者，肝细胞的破坏程度更加严重，线粒体也受到了严重的破坏，因此AST升高明显，AST/ALT＞1，甚至＞2。

【检测方法要点】多使用连续监测法，IFCC推荐用苹果酸脱氢酶（MD）作为指示酶。但由于产物草酰乙酸不稳定，易转变为丙酮酸，故将LD作为辅助酶。

二、γ-谷氨酰基转移酶及其同工酶

γ-谷氨酰基转移酶（GGT）又称γ-谷氨酰转肽酶，是一种含巯基的线粒体酶，参与体内谷胱苷肽的代谢。

【组织分布】肾脏、肝脏和胰腺中含量丰富，血清中GGT主要来自肝胆系统。GGT在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统。GGT同工酶的形成与其糖链上唾液酸的含量、种类不同有关，正常血清GGT可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种同工酶，其中以Ⅱ型为主，Ⅰ型次之，Ⅲ型最少。不同组织的GGT同工酶有差异，但主要酶学性质都近似。

【临床意义】血清GGT主要用于诊断肝胆疾病，可了解急性肝炎是否痊愈，能否向慢性肝炎转化，诊断酒精性肝炎及肝损伤程度，辅助诊断原发性和继发性肝癌，原发性肝癌时，GGT-Ⅱ明显提高。测定尿液中GGT有助于诊断肾小管疾病。

【检测方法要点】多使用连续监测法，以色素原GCNA为底物，宜采用双试剂法，底物启动模式。

三、肌酸激酶及其同工酶

肌酸激酶（CK）能催化高能磷酸键在肌酸和ATP之间转换，生成磷酸肌酸和ADP的可逆反应。磷酸肌酸的高能磷酸键是肌肉收缩时能量的直接来源。

【组织分布】CK主要分布在脑组织和各种肌肉组织中，为二聚体结构，由M和B两个亚基构成，可组成三种同工酶，即CK-MM、CK-MB、CK-BB。CK-MM主要存在于骨骼肌中，平滑肌以CK-BB含量相对较高，CK-BB在脑中的含量明显高于其他组织，心肌是CK-MB含量丰富的唯一器官。

【临床意义】CK-MB是确诊AMI的实验指标之一，心肌梗死发生后4~8小时开始升高，12~48小时达峰，2~3天恢复正常。皮肌炎、肌营养不良、骨骼肌损伤也会使CK升高，主要为CK-MM，应注意肌营养不良时CK升高，但随着肌肉萎缩会有所下降。脑血管意外时，部分患者CSF和血液中CK均升高，主要为CK-BB。甲状腺功能低下时，CK升高可达正常上限的50倍，主要为CK-MM。

【检测方法要点】多使用酶偶联连续监测法，常用NAC、谷胱甘肽和巯基乙醇作为激活剂，偶联己糖激酶（HK），以葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-P-D）为指示酶。注意溶血标本测定CK时结果明显偏高，其原因为红细胞中的腺苷酸激酶（AK）的干扰。

四、乳酸脱氢酶及其同工酶

乳酸脱氢酶（LD）是临床应用较多的一种脱氢酶，属于氧化还原酶类，是参与糖无氧酵解和糖异生的重要酶。

【组织分布】LD存在于所有体细胞的胞质中，以骨骼肌、肾和心肌中含量最为丰富。LD由M和H两个亚基组成四聚体，共形成5种结构不同的同工酶。分别命名为LD1（H4），LD2（H3M），LD3（H2M2），LD4（HM3），LD5（M4）正常成年人血清LD同工酶电泳区带的结果为LD2＞LD1＞LD3＞LD4＞LD5。LD1主要分布在心肌，也存在于红细胞中，且活性为心肌LD1的100倍；LD5主要分布在横纹肌和肝脏；LD3主要存在于脾和肺。LD同工酶的组织分布相对集中，但某些组织器官可存在一种或多种同工酶。

【临床意义】在急性心肌梗死时，升高最慢（8~10天），达峰晚，对早期诊断意义不大，但由于半寿期长，多用于回顾性诊断。肝脏疾病及肌肉损伤时LD可升高，以LD5为主。

【检测方法要点】LD活性的测定方法有两种：根据从乳酸氧化成丙酮酸的正向反应（L→P），监测吸光度上升速率，称为LD-L法；根据丙酮酸还原成乳酸的逆向反应（P→L），监测吸光度的下降速率，称LD-P法。正向反应连续监测法是IFCC和我国检验学会的推荐方法。

五、碱性磷酸酶及其同工酶

碱性磷酸酶（ALP）属磷酸单酯水解酶，是一组特异的磷酸酯酶，可催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。

【组织分布】ALP是一组同工酶，分为四型：生殖细胞型（GCAP）、胎盘型（PALP）、肠型（IAP）和非特异组织型（TUAP）。ALP几乎存在于机体的各个组织，但以骨骼、牙齿、肝脏和肾脏含量最多，正常人血清中的ALP主要来源于骨骼，由成骨细胞产生。

【临床意义】 ALP经肝胆系统排泄，所以当肝胆系统疾病时，尤其是梗阻性黄疸时，肝内胆汁反流入血，可引起血清ALP明显升高。肝细胞性黄疸时升高不明显。原发性和继发性肝癌时，血清ALP活性明显升高。变形性骨炎、成骨细胞癌、佝偻病、骨软化、甲状腺及甲状旁腺功能亢进等疾病时，血清ALP活性明显升高。

【检验方法要点】多使用连续监测法，IFCC推荐AMP作为缓冲液，AMP为激活型缓冲液，同时作为酶的底物参与磷酸酰基的转移，可增进反应速率，所测得的ALP活性要比用碳酸盐缓冲液高2~6倍，因此使用不同缓冲液的方法测的ALP活性参考区间不同。溶血标本ALP酶活力下降，抗凝剂EDTA-K2可抑制酶活性。

六、酸性磷酸酶及其同工酶

酸性磷酸酶（ACP）是一种在酸性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶，作用与ALP类似，但作用的最适pH偏酸，为4.5~7.0。

【组织分布】分布广发，主要存在于巨噬细胞，定位于溶酶体内，其中以前列腺含量最多。女性血中ACP可能来自血小板和破骨细胞。ACP同工酶分为前列腺ACP（PAP）和非前列腺ACP两大类。

【临床意义】血清中ACP活性测定主要是作为前列腺癌的辅助诊断、疗效观察及预后判断的指标。前列腺癌，特别是存在转移时，血清ACP明显增高，PAP更有诊断价值。

【检验方法要点】使用连续监测法检测，但ACP 性质极不稳定，血清室温放置2.5小时ACP活力即可下降10%左右。

七、淀粉酶及其同工酶

α-淀粉酶（AMY）属于糖苷链水解酶，作用于α-1,4糖苷键，是一种钙依赖性金属蛋白酶，卤素和其他阴离子对其有激活作用。

【组织分布】AMY主要存在于胰腺和唾液腺中，有两种同工酶，即唾液型（S-AMY）和胰腺型（P-AMY）。

【临床意义】AMY主要由唾液腺和胰腺分泌，可通过肾小球滤过，是唯一能在正常时出现在尿液中的血清酶。流行性腮腺炎、急性胰腺炎时，血和尿中的AMY 显著升高。急性胰腺炎发病后2小时血清AMY开始升高，12~24小时达峰，2~5天下降至正常。尿AMY约于发病后12~24小时开始升高，下降也较血清AMY慢，在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。

【检验方法要点】传统方法为碘-淀粉比色法，该法测定结果高于500U/L为诊断急性胰腺炎的重要依据。自动化生化分析仪常使用酶法连续监测，多以对硝基酚麦芽七糖苷或对硝基酚麦芽三糖苷为底物。

作者：裴世静   山西省临床检验质量控制中心