血型检测与输血反应相关问题的分析及处理

ABO血型检测

输血前对受血者和供血者必须做RBC抗原检查及血清抗体检测，二者的结果必须一致。用已知的血型抗体血清去鉴定未知的RBC血型称主侧试验(正定型)，用已知A型、B型的RBC去检查未知的血清，从反面确定血型称为副侧试验(反定型)。两项检测应由人工分别进行。确认两者结果完全相符时才可发生报告。

所用抗体血清除抗A标准血清和抗B标准血清外，尽可能再加高滴度的抗A+B血清(O型血清)，可发现变异血型。ABO标准血清的质量必须完全符合要求标准，这一点非常重要。临床ABO定型错误的主要原因就是血清质量不高。所用的RBC，应收集前1天已经确定的A型和B型RBC数人份，分别用生理盐水洗涤数次，制成5%RBC混悬液。此悬液最好每日新配，如保存于冰箱里，不能超过3天。

鉴定血型注意事项

正定型注意事项：①更换新的批号抗血清或对试验结果有怀疑时，可设阳性、阴性和自身对照。抗A管的阳性对照用抗A标准血清加已知的A型红细胞；抗B管的阳性对照用抗B标准血清加已知的O型红细胞；自身对照用两支试管，其中一支是被检者血清加被检者红细胞，另一支试管中相继加入被检者血清与相应5%红细胞生理盐水混悬液，加入量及操作步骤与正定型试验相同。判定结果时，首先看对照管，当阳性对照管为阳性，阴性对照管为阴性，自身对照管为阴性时，测定管的结果才可信，否则必须查找原因。②为避免交叉污染，吸管、试管、破片等用品只能1次性使用，红细胞悬液浓度过高或离心力过大，可造成假凝集，操作时必须注意。操作环境温度应在20～25℃，操作中应严格遵守查对制度，观察后要立即记录正确结果。③被检红细胞异常，如A或B亚型。白血病可使A或B抗原减弱而误定为O型；霍奇金病也有类似白血病的情况，出现获得性B或A表现等。

反定型注意事项：①不宜用玻片法，因为献血者或患者血清有时凝集力较弱，必须经过离心使红细胞紧密接触，否则不足以使红细胞凝集。试管离心后，应先观察上清液有无溶血，然后摇动底层细细胞进行观察，若出现溶血现象表明存在抗原抗体反应并有补体激活，应视为阳性反应。因为患者新鲜血清做反定型时，由于补体作用发生溶血，如未注意溶血现象，会使结果判断错误或遗漏。②反定型必要时加管“O”型红细胞以查出孟买型抗H抗体，同时可查是否有缗钱状细细胞形成和血清中偶可见到的少数与血型抗原无关但能使红细胞发生凝集的物质。老年人、白血病患者、骨髓瘤患者、先天性免疫球蛋白缺乏、长期大量应用免疫抑制剂者，血型抗体可减弱或消失，造成反定型困难。血清中存在非特异性血型抗体，冷凝集素效价增高，多发性骨髓瘤免疫球蛋白异常均可造成反定型困难。

导致正反定型不一致的常见问题：ABO分型标准血清效价太低、亲和力不强。细细胞悬液配制过浓、过淡，抗原比例不适当，使反应不明显，可出现假阴性。受检者红细胞上抗原位点太少或抗原减弱。受检者血清中缺乏应有的抗A、抗B抗体，或其效价过低。受检者血清中蛋白紊乱或实验室温度过高，常引起红细胞呈缗钱状排列。细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往也是正反定型不合的原因。血清中有意外抗体如自身抗I、抗P、抗M、抗N等。新生儿、老年人、低免疫力人群的血清中的抗A、抗B效价太低甚至缺乏，均可出现正反定型不均。

交叉配血试验

交叉配血试验是指检查患者和供血者血清中是否存在与对方RBC起反应的抗体，以选择适于输血的血液。此项检查的目的在于防止发生输血反应(溶血)。这里应考虑的是虽然患者和供血者的血液ABO血型相同，hho(D)因子相等，交叉配血试验也无异常反应，可以认为输血是安全的，但红细胞膜上的抗原完全相同的人只有一卵双生儿，因此输入患者体内的红细胞有时起异物作用，产生免疫抗体。如果患者血清中存在抗体，在检查的低限值以下时，输入体内红细胞可以发生记忆性免疫反应，使抗体量迅速增加，在输血后7～10天可发生迅速的RBC破坏。

因此交叉配血试验，即使未呈现异常反应，以后也有复查的必要，所以不能扔掉供血者的血液，需要放在冰箱中保存2～3周，对于重复输血的患者要每周采血做1次交叉配血试验，以观察是否有免疫抗体的产生。

输血反应的检查

关于输血反应的原因主要有：①血型不合；②发热反应；③过敏反应；④疾病反应；⑤血液被细菌污染等。此外还有心脏负荷过重、枸橼酸中毒、肝障碍时氨中毒、血栓静脉炎、空气栓塞等。

不合输血原因分析：①ABO血型鉴定错误：由于只做主侧试验，而且使用全血，因为标准抗体血清不佳而发生鉴定错误。交叉配血时因紧急输血只作血型鉴定，未做交叉配血试验，以至于未发现血型错误。将ABO血型的变异型(Ax、Am、Bx、Bm)鉴定为O型，输O型血，虽无凝集反应，但抗体被吸附，致敏RBC破坏而发生反应。②未做交叉配血试验：因抢救性输血，时间紧迫而未做交叉配血试验，可能因ABO血型系统以外的抗原、抗体反应引起输血反应。③交叉配血试验的做法问题：由于精神不集中，责任心不强，忘记加血清。或只做生理盐水法而未做不完全抗体检测法。④人为的事故性错误：如取错血样、贴错标签等。

输血反应检查步骤：输血反应的检查有症状分析和原因分析两方面，当然重点在原因分析方面。因为查明原因和排除输血反应的原因对今后再输血是非常必要的。输血反应最好由两名有经验的检验医师进行检查为好。主要措施有：①立即中止输血。②将残血和输血用具送检验科检查。③复查受血者，供血者的血型及交叉配血试验。检查时要用试管法，不仅用肉眼检查还要在显微镜下看，同时要考虑有无亚型或变异型。检查时不仅用抗A、抗B血清，还要用抗A+B血清(O型血清)。必要时检查供血者血袋和留取血样试管是否相符。④采取患者血液分装两支试管，一管加肝素抗凝，一管分离血清。⑤留取患者尿液送检，检查有无红细胞管型，血红蛋白(Hb)尿、胆红素、含铁血黄素等，尿量等。⑥必要时检查肾功和DIC。⑦要了解血液在输血前的情况，如是否经过冷冻，是否在室温放置太久，输血前是否将血液加温处理等。