腺相关病毒的局限性有哪些？

1. 体外实验表达水平较低：

主要是因为 rAAV 病毒的基因组是单链 DNA，在体外环境形成双链并转录翻译外源基因的效率非常低。可以在体外水平感染 rAAV 病毒的同时感染辅助病毒比如 Ad5 型腺病毒或者终浓度 10~50 mM 的丁酸钠等方法提高细胞实验的 rAAV 表达量。

2. 需较长时间开始表达：

同样是需要从单链 DNA 变成双链 DNA，rAAV 在感染后需要较长的时间来表达外源基因，所以 rAAV 感染后建议至少 1 周后做切片观察。

3. 载体容量较小：

腺相关病毒载体作为基因治疗的载体，目前最多只能容纳4.7Kb外源DNA片段