三种生物缓冲剂MOPS、HEPES、CHAPS的特征和应用
MOPS的特征
MOPS的全化学名称为3-(N-Morpholino)-Propanesulfonic Acid,是一种两性离子生物缓冲剂。常温下为白色粉末状固体,亲水性高,水溶性好(20℃时1000 g / L)。将MOPS溶于水时,其水溶液外观为无色。
MOPS的应用和注意事项
由于有用的pH范围介于6.5和7.9之间,MOPS经常用于分子生物学和生化研究。MOPS不仅是用于蛋白质纯化和提取的pH缓冲剂,还是细菌,酵母和哺乳动物细胞的缓冲培养基的成分,也是通过琼脂糖凝胶电泳分离RNA的运行缓冲液的最佳选择。由于缺乏与大多数金属离子形成螯合物的能力建议在制备含金属离子的溶液时将MOPS用作非配位缓冲液。
需要注意的是,如果您打算在使用MOPS之前对其进行灭菌,请不要对其进行高压灭菌。根据相关研究文献,当通过高压灭菌法对MOPS进行灭菌时,未知的淡黄色物质会作为降解产物产生,因此,推荐使用通过孔径为0.2微米或更小的膜过滤来进行MOPS灭菌。
HEPES的特征
HEPES的全化学名称为4-羟乙基哌嗪丙磺酸,是一种非离子两性生物缓冲剂。常温下为白色粉末状固体,亲水性高,水溶性好。
HEPES缓冲液的应用
由于培养中细胞的生长和代谢会导致培养基的环境pH值发生剧烈变化,因此,为了维持可以稳定培养细胞的环境,有必要向其中添加适量的某些生物缓冲液。文化媒体。但是,市场上有如此多的生物缓冲液和替代品可用于细胞培养,为什么要使用HEPES?
大多数细胞的最佳培养环境是pH 7.2-pH 7.4,HEPES的缓冲范围恰好在pH 6.8-pH 8.2内,这对于细胞培养是有利的。与其他缓冲液(例如PBS(磷酸盐缓冲盐水)和TRIS)相比,HEPES在维持细胞培养基的pH值方面具有更高的稳定性,这也是HEPES广泛用于细胞培养,组织培养,蛋白质纯化和提取,免疫沉淀,细胞裂解,活细胞成像和其他生物/生化研究的原因。
CHAPS的特征
CHAPS(CAS 75621-03-3)是一种不变性的两性离子表面活性剂,全化学名称为3-[(3-氯氨基丙基)二甲基铵基] -1-丙烷磺酸盐。在常温下为白色粉末固体,具有良好的水溶性(50 mg / mL),但在分子水平上也具有疏水性。将CHAPS溶于水时,其水溶液的外观将是无色至浅黄色的透明色。
CHAPS的应用
一些研究表明,与NP-40和Triton X-100相比,CHAPS可以温和有效地破坏核膜,溶解膜蛋白并破坏蛋白-蛋白相互作用(PPI)。此外,CHAPS可以保护蛋白质的天然状态或构象,而且可以维持蛋白质的活性和功能。因此CHAPS被广泛应用于生物科学研究领域,如细胞裂解和蛋白质纯化。重要的是要注意,在使用CHAPS配制任何溶液时,请尽量不要剧烈摇晃或搅动。