稳定细胞株构建条件有哪些?
1. 长期在目的细胞中研究基因功能,通过构建稳定株,可以大大降低频繁转染或者病毒包装的成本,也极大方便实验研究;
2. 部分蛋白半衰期极长,瞬时 RNA 只能干扰表达,无法去除已经表达的目的蛋白,通过构建稳定株可以实现更好的基因干扰效果;
3. 瞬转往往会引入极高拷贝数的表达,导致因为人为因素造成实验结果的不精确,构建稳定株可以帮助筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究;
4. 需要用诱导表达系统的,主要是一些致死基因或者是需要时空表达的;
5. 需要用细胞做动物实验的,比如裸鼠成瘤等,往往需要构建成稳转株。
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