萤光素酶实验具体有哪些应用?
1、验证microRNA同mRNA靶向互作。将待测基因的3’UTR序列插入报告基因载体,再共转入该microRNA,检测荧光素酶活性下降,则提示为其靶序列。
2、验证microRNA同lncRNA靶向互作。将待测lncRNA序列插入报告基因载体的3’UTR区域,检测荧光素酶活性。
3、启动子结构分析。将启动子区域(约2k左右)进行分段截短或突变,构建入报告基因载体,检测荧光素酶活性。
4、启动子SNP分析。一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性,可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。
5、验证信号通路是否激活。将该信号通路的下游相应原件序列构建入报告基因载体,检测不同上游条件下,其荧光素酶活性,即下游信号通路的响应情况。
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