【综述】用于细胞外囊泡的分离、检测和表征的微流体方法

细胞外囊泡(EVs)是存在于体液中的细胞来源的囊泡,其在各种细胞活动过程中起重要作用,例如细胞间通讯、炎症、细胞稳态、存活、转运和再生。从体液中分离和分析细胞外囊泡具有很大的临床潜力,可以为各种疾病的进展提供信息,如癌症、心血管并发症和炎症性疾病。尽管目前研究者们对这一领域产生了越来越多的科研和临床研究兴趣,但仍然没有可用于对细胞外囊泡进行纯化、检测和表征的标准化程序。微流体的进步使得化学制样具有越来越高的空间分辨率,并且在精细操作下能达到单分子水平。在这篇发表在Biosensors and Bioelectronics杂志(IF=7.476)的综述中,来自荷兰乌得勒支大学(Utrecht University)的研究人员概述了利用微流体技术分离和检测细胞外囊泡的工作原理和实例。该综述还重点提及了用于分离和表征细胞外囊泡的集成芯片系统。

综述内容包括:

1    介绍
2    EV分离技术,是EV处理过程中的重要准备步骤
2.1    传统的EV分离和分选技术
2.2    用于EV分离和分选的微流控技术
2.2.1    EV的芯片分离技术概述
2.2.2    用于芯片分离EV的集成技术
3    EV样品的检测
3.1    单峰检测技术
3.1.1    电动检测
3.1.2    机械检测
3.1.3    光学检测
3.1.4    非光学检测
3.2    多模态检测技术
3.2.1    电化学检测
3.2.2    扫描离子遮蔽光谱(SIOS)
3.2.3    光电检测
4    集成芯片的不同的检测和表征部件
5    微流体的高通量能力和标准化
6    总结、评论和未来展望

图1:目前的一些细胞为囊泡分离方法及优缺点

图2:基于内部和外部的不同特征,使用微流体技术分离不同的EV群体

图3:A)与激光暗视野显微镜集成的毛细管电泳(μCE系统)芯片的示意图。这是由不同的隔间组成的系统,如电极、电源、488nm激光源、电子倍增电荷耦合器件(EM-CCD)照相机和倒置显微镜(Nikon Ti-U)。(B,C)在μCE芯片上,没有抗原和有抗原的EV的免疫电泳示意图。

参考文献:Gholizadeh S, Shehata Draz M, Zarghooni M, Sanati-Nezhad A, Ghavami S, Shafiee H, Akbari M. Microfluidic approaches for isolation, detection, and characterization of extracellular vesicles: Current status and future directions. Biosens Bioelectron. 2017 May 15;91:588-605.

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