GST融合蛋白纯化是什么?

GST (Glutathione S-transferase),即谷胱甘肽巯基转移酶,全长211个氨基酸,分子量为26kDa,广泛应用于重组蛋白表达以及亲和纯化实验中。GST具有高度的亲水性,因此也常被用于改善目的蛋白的可溶性。例如某些蛋白进行6´His 融合表达的时候,如果产生的蛋白可溶性较差,可以采用更换质粒载体的方法进行GST融合表达以改进目的蛋白的可溶性。

GST纯化系统是利用GST融合蛋白与固定的谷胱甘肽(GSH)通过二硫键共价亲和,通过GSH交换洗脱的原理进行蛋白纯化。GST能够催化GSH形成GS-GST的复合物。根据这一特点,将GSH交联到琼脂糖凝胶颗粒(Beads)上后,利用GST的催化能力形成Bead-GS-GST-protein的复合物从而将目的蛋白从复杂的混合物中纯化出来。

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