cre鼠的类型及应用

为了更好的控制Cre重组酶的表达时间,通过使用具有雌激素受体的突变配体结合结构域的Cre融合蛋白(Cre-ERT),可以实现对Cre活性的时间控制,该蛋白可以通过他莫昔芬诱导而被激活[1]。在无他莫昔芬诱导时,Cre-ERT融合蛋白与热激蛋白Hsp90结合,定位于细胞质中;当他莫昔芬给药诱导时,Hsp90脱离Cre-ERT融合蛋白,使Cre-ERT融合蛋白暴露核定位信号进入细胞核,发挥基因重组的作用[3]。这一融合蛋白的介入相当于为Cre-Lox系统加装了一个由他莫昔芬控制的外源开关,使得体内基因编辑更具时空灵活性。为了提升该系统的灵敏性、特异性,ER配体结合结构域被进一步突变为Cre-ERT2,该系统对他莫昔芬代谢活性物质4-羟基他莫昔芬(TAM主要通过肝脏的细胞色素P450酶代谢为活性产物4-OH-TAM)的敏感性提升了10倍[4]。同样的,Cre-ERT2并非完美无暇,Poorva Sandlesh等人研究发现CreERT2-Lox系统在敲除SSRP1的应用中,存在效率过低问题[5]。

Cre鼠常用于与Flox小鼠杂交进行条件性的目的基因敲除,但也有研究将Cre鼠用于切割位于报告基因前的终止序列,以达到荧光标记特定细胞的目的,进一步研究细胞命运。

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