腺相关病毒包装​技术原理

技术原理：

腺相关病毒( adeno-associated virus，AAV)是一类细小病毒，基因组为单链DNA，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。通常需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。重组腺相关病毒（recombinant AAV, rAAV）是利用AAV2 型基因组与不同血清型的衣壳蛋白基因组结合产生的混合体病毒载体，可将目的基因的CDS 区序列或者RNAi 干扰序列插入rAAV 表达质粒中，包装病毒后感染细胞完成对目的基因的操作。在人类和小鼠中，AAV 感染可以介导外源基因发生低频率（不高于2%）的定向整合，插入的位置一般在19 号染色体短臂（人类基因组中的AAV S1 和鼠中的ROSA26 位点）。病毒基因组在不发生整合的情况下在被感染细胞内形成伴随体。腺相关病毒广泛应用在神经领域、心血管领域、肝脏、肌肉、肺、及其他领域，其主要的应用方向在于定位注射和整体注射。

腺相关病毒颗粒经过超速离心纯化，并通过qPCR对病毒基因拷贝进行滴定。腺相关病毒的滴度在10^12~10^13v.g. /ml，完全可以满足各类整体实验的使用要求。

研究发现AAV 具有多种血清型，各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳蛋白不同，因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。