摘录 | 2020 版美国兽医协会动物安乐死指南解析
目前，随着动物福利水平的总体提升，实验动物研究领域如何对其实施安乐死正逐步引起人们的重视。一系列“指南”和“法规”的出台，使实验动物安乐死的相关定义及操作得到了规范。
在实验动物饲养及使用机构对动物相关研究计划进行评估时，实验动物安乐死方法的选择以及具体实施方案是极为重要的部分。选择合适方法对动物进行安乐死，不但要能最大限度地减少动物死亡过程中所承受的痛苦，而且还要考虑对操作人员心理的影响。
针对动物安乐死，美国兽医协会（American Veterinary Medical Association，AVMA）出版了一系列参考资料，对动物安乐死的相关内容进行了解析和阐述。现行的3部AVMA指南分别为：
2020年出版的《AVMA动物安乐死指南》
2019年出版的《AVMA动物群体扑杀指南》
2016年出版的《AVMA动物屠宰指南》
其中，涉及实验动物安乐死的指导性文件为2020年出版的《AVMA动物安乐死指南》（以下简称指南）。该文件是世界范围内实验动物安乐死操作所普遍使用的指导性文件。
本文将从2020版《指南》中挑选部分内容进行展示，以便大家对常见的实验动物如何选择合适的安乐死方法能够快速了解最新版《指南》的更新内容。
实验动物安乐死方法主要有吸入过量麻醉气体、注射过量麻醉药物以及物理性方法。在可采用的安乐死方法中，又分为可接受的安乐死方法和条件性接受安乐死方法。
所谓可接受的安乐死方法是指通过单一方法即可保障人道地实施动物安乐死，通常为动物的首选安乐死方法，比如过剂量戊巴比妥钠注射处死。而条件性接受安乐死方法是指需要在满足一定的前提条件下，才能够保证人道地实施动物安乐死，比如颈椎脱臼法、断头术等。
2020版《指南》的附录表列出了根据动物品种选择的安乐死方法和药物。
常用实验动物安乐死方法
啮齿类动物（如大鼠、小鼠）的安乐死应首选注射巴比妥类药物。此类药物对啮齿动物起效快速，能使动物较平顺地进入无意识状态。值得注意的是，腹腔注射巴比妥类药物可能会造成动物疼痛。
氯胺酮等分离型麻醉剂也可用作啮齿类动物的首选安乐死药物。但是，如果动物尚处于清醒状态，此类分离型麻醉剂必须与α2肾上腺受体激动剂联用，例如甲苯赛嗪或苯二氮唑类麻醉剂（如：地西泮）。
当药物残留可能会影响到取材组织的分析结果时，也可以选用吸入性气体安乐死动物。国内常用二氧化碳作为吸入性气体安乐死动物。
使用二氧化碳安乐死方法应注意：动物安乐死容器保持清洁，动物在笼盒内不能过于拥挤，笼盒内的气体应该清除干净才能进行下一次安乐死操作。二氧化碳气体需来源于体钢瓶，不应含污染物或杂质。同时，二氧化碳安乐死装置还应包含一个适当的减压阀和流量计，以保证二氧化碳置换率能够符合《指南》的建议。
二氧化碳置换率应设置在30%~70%（2020版《指南》），此置换率较2013版《指南》建议的10%~30%有所提高。然而，还没有一个最佳的二氧化碳置换率可以完美地既减少动物因低流速引起焦躁，又防止流速过高引起黏膜疼痛。因此，各单位兽医还应根据自己的专业判断，选择最适合该设施的二氧化碳流速。
挥发性麻醉气体安乐死也可作为啮齿动物的条件性接受安乐死方法，例如异氟烷、七氟烷和地氟醚。若使用挥发性麻醉气体法，动物需要在气体中暴露足够的时间或采用辅助性安乐死方法，以确保动物死亡。
啮齿类动物的物理性安乐死方法有颈椎脱臼、断头和微波辐照。这些物理性安乐死方法可以防止动物组织被化学试剂污染。颈椎脱臼常用于小鼠和小于200 g的大鼠。且实施颈椎脱臼和断头操作的人员必须经过良好的训练。此外，对于需要立即固定脑部代谢物的研究，可使用聚焦束微波辐射的方法（需要特殊的设备）对动物进行安乐死（2020版《指南》）。
吸入氮气和氩气、单独注射氯化钾、单独注射神经肌肉阻断剂，以及注射阿片类、乌拉坦和α-醛聚糖不可作为啮齿类动物的安乐死方法。
不作为安乐死首选的可接受的方法和药物
关于水合氯醛
1.水合氯醛是否可以用于小鼠麻醉？
答：从实验动物福利角度来说，由于其本质属于一种催眠药，所以不能保证手术过程的镇痛作用，并且过量注射会导致大鼠肠梗阻，腹膜炎以及胃溃疡等多种不适反应，同时还具有较大神经毒性。因此，从实验动物福利角度来说，水合氯醛的确不适合动物麻醉，仅适合镇静催眠使用。
2.水合氯醛是否可以用于小鼠安乐死？
答：上个问题中我们已经了解到水合氯醛虽然大剂量可以导致小鼠死亡，但是由于其存在很强的副作用。美国兽医协会（AVMA）发布的“动物安乐死指南”（AVMA Guidelines for the Euthanasiaof Animals：2013 Edition），明确指出鉴于水合氯醛严重的副反应，水合氯醛不是合适的安乐死药物。