三羟甲基氨基甲烷醋酸盐缓冲区

TAE缓冲液是由Tris碱，乙酸和EDTA（Tris-acetate-EDTA）组成的溶液。它是用分析PCR扩增，DNA纯化方案或DNA克隆实验产生的DNA产物的琼脂糖凝胶电泳最常用的缓冲液。

该缓冲剂具有低离子强度和低缓冲能力。它最适合大型（> 20千碱基）DNA的电泳，需要经常更换或循环使用更长的时间（> 4小时）。考虑到这一点，就要考虑制作多个批次的缓冲区。

鉴于缓冲区易于制造且步骤易于快速执行，因此一次生产多个批次会效率更高。按照以下说明，只需30分钟即可制作TAE缓冲区。

TAE缓冲区需要准备什么

由于制作TAE缓冲区仅需要快速简单的指令，因此所需的材料数量并不太多。只需要EDTA（乙二胺四乙酸）二钠盐，Tris碱和冰醋酸。

制备缓冲液还需要适当的pH计和校准标准，需要600毫升和1500毫升的烧杯或烧瓶、量筒，离子水，搅拌棒和搅拌盘。

特别说明：公式重量（每个元素的原子质量乘以原子数，然后将每个原子的质量相加）缩写为FW。

提前准备EDTA，将pH值调节到8.0，否则EDTA不会完全溶解。对于0.5毫升（摩尔或浓度）EDTA的500毫升储备溶液，称出93.05克EDTA二钠盐（FW = 372.2）。将其溶于400毫升去离子水中，并用氢氧化钠（NaOH）调节pH值。加满溶液至最终体积为500毫升。

库存解决方案

①称量242克Tris碱（FW = 121.14），并将其溶解在大约750毫升的去离子水中，制成TAE的浓缩（50x）储备液。小心加入57.1毫升冰酸和100毫升0.5 M EDTA（pH 8.0）。

②将溶液调整至最终体积为1升，该储备溶液可以在室温下保存。此缓冲液pH值应约为8.5。

③准备TAE缓冲液的工作溶液，通过在去离子水中简单地将储备溶液稀释50倍，即可制成1倍TAE缓冲液的工作溶液。最终溶质浓度为40 mM（毫摩尔）三乙酸盐和1 mM EDTA。现在可以使用该缓冲液运行琼脂糖凝胶了。

在开始确定库存之前，请先检查库存，以确保上述用于TAE缓冲器的所有材料。供应人员可以提前列出所有物品。