干细胞回输选第几代?多久见效?选自体还是异体?
作者｜狼瓜校长 、审校编辑｜摩西
01 干细胞多久见效？持续时间多久？
回答这两个问题其实是很难的，但同时又是频繁被问到的问题。还是做一个类比吧，感冒了吃药或者不吃药，在感冒治愈之前我们是没有任何人可以预测到这次感冒要持续多久。
“首先，每个人的应用情况是不同的，有些是亚健康（症状不一样）、有些是疾病（病种不一样），其中又涉及到性别、年龄、地域、遗传、单病种和多病种、疾病进展状况等等的因素，造成个体之间的差异千差万别。
其次，输注方式是不同的，动脉、静脉、局部注射以及是否联合其它疗法等。
再次，生活方式和作息习惯也会对进入体内细胞的生存率和活性产生影响。
最后，使用的细胞类型、细胞数量、间隔周期等因素也会导致最终结果不同。
总而言之，每一个我们可能想到的点，最终都会影响到细胞所能起到的效果以及持续性的问题。”
目前比较普遍的规律是，几分钟到3天会有比较明显的注射反应，之后的两周内会细胞发生迁移产生生物反应，未来6-12周会逐渐产生疗效反应，持续时间一年到几年不等。
注射反应：有三个层面的意思，一是只要有外源性物质的输入都会引起我们相应的反应，二是极低概率的敏感体质的人对细胞产生的反应，三是细胞本身产生的分泌物作用于人体产生的反应。
生物反应：是指细胞在在各个器官迁移，在不同的微环境中释放出不同细胞因子或者分化为相应类型的功能细胞，相应的产生的微环境的变化给身体带来的感觉。
疗效反应：是指细胞已经适应体内环境并在功能层面开始运作，对我们的身体进行修复或者抑制某些不好的反应，我们在主观感受和生理指标上能够实实在在得到的反馈。
效果持续多久这个问题涉及到的东西就更复杂了，同样的一批鱼苗放到不同的池塘里面，中间的饲养方式不一样，半年后捕获，鱼的重量、体型、颜色都会不一样，类似的道理同样适用于细胞，每个人的体内环境不一样，每个人的生活作息规律不一样，造成的结果也完全不一样。
现实中不乏这样的例子，应用细胞就是为了天天喝酒，天天熬夜，天天放纵，这样是不可取的，就如同伤口还没有结痂脱落，我们动不动就去抓伤口，造成经久不愈，细胞绝对不是神丹妙药，更不是急救药，也因此郑重的劝诫所有人用了细胞还需要好好遵医嘱，作息规律，起码也要等本钱足够了再去挥霍，否则只能等着吃后悔药。
再说一下效果持久和多久需要再补充的问题。
我们的健康值就如同电池的电量一样，从100到0，现在可能大多数的人处于75甚至是50。我们的电量即使只是在待机也在慢慢消耗，通过补充细胞或者其它方法都可以提高健康度即使达到100，也不会像之前那样经用，因为电池老化容量本身已经出了问题。
同样75电量的手机，同样在充电，一个什么也不玩，一个只是在聊微信，一个在玩游戏，想充到100的电量，需要的时间是不一样的。
同样50电量的手机，有些人觉得到30才需要充电，有些人觉得维持50也挺好，有些人觉得充到80才能放心。
所以，何时见效？效果多久？何时补充？取决于个体差异的健康状况，取决个体差异的生活习惯，取决于个体差异的健康理念。
02 干细胞应用到底选择第几代？
当临床应用干细胞治疗时，选择哪个代次的干细胞治疗更加合适，是经常被问到的问题。人分男女老少，而干细胞也有年轻和衰老之分，细胞代数也是影响临床治疗效果的重要因素。
我们先来看看细胞代次的概念：目前最主要的表述有两种，一种是细胞世代，一种是传代代数，具体见下表。
备注：P0为刚从组织分离出来的原代细胞，一般干细胞传代扩增倍数为3-5倍，图表中以3倍为例。
现在我们常说的细胞代次是传代代次，如果换算成细胞世代的话可以有一个粗略的对比，传代代次的3代细胞相当于细胞世代的5代，传代代次的4代细胞相当于细胞世代的6-7代，传代代次的5代细胞相当于细胞世代的8代。依次类推，中间不考虑损耗和各实验室培养工艺和培养体系的差异，如果干细胞传代扩增倍数用5倍来计算的话，传代代次和细胞世代之间的差距是更大的。
理论上讲，细胞代数越靠前，干细胞的干性也越强。但是干细胞在体外培养的过程中，干细胞有从组织微环境到体外培养环境的一个调整和适应过程，一部分不适应的细胞会被淘汰，所以在前两三代，干细胞基因组有着不稳定的因素，可能不宜临床应用。有研究显示，通过核型分析发现，在前三代细胞中，干细胞存在异常核型的比例偏高。就如间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）而言，临床应用的最佳代数应该在4~6代。
目前临床研究中，MSC应用较为常见的来源骨髓、脂肪、脐带、胎盘等，本文以脐带、脂肪、胎盘这三类比较常见的来源进行总结，针对不同来源间充质干细胞，体外传代培养后不同代次的一些生物学特性的变化（例如：细胞形态、细胞周期检测、表面标记物检测、染色体核型分析、相关基因表达及细胞因子的定量分析）。
人脐带间充质干细胞长期体外传代培养后其基本的干细胞生物学属性, 如细胞表面免疫标志物和诱导多向分化潜能, 无显著性改变。长期培养至20代, 未发现致病性或致瘤性基因变异。高代次(P20)hUC-MSCs的细胞增殖活性和端粒酶活性与早期低代次(P5)细胞无显著性差异。随着培养代次的增加, 细胞开始出现老化, 尤以20代细胞表现最为明显。
不同代次人脐带间充质干细胞的形态学观察
体外传代培养至第5、10代hUC-MSCs呈现完全相同的细胞形态与生长排列方式, 均呈现长梭状贴壁生长, 轻度螺旋流水状排列。第20代细胞呈现非常相似的长梭状贴壁生长, 但胞体略显增大, 融合后局部排列紊乱。
已有研究显示, 虽然高代次培养的hUC-MSCs染色体组型依然保持稳定,但至第7代时其端粒酶活性会有所下降。我们通过检测人端粒酶逆转录酶活性亚单位基因的表达显示, 第5、10和20代hUC-MSCs的端粒酶活性之间并没有显著性差异; 且不同代次细胞呈现相似的生长增殖曲线, 表明它们的细胞增殖活力也无差异性。
虽然第20代hUC-MSCs依然保持与低代细胞类似的干细胞生物学属性、基因稳定性和生长特征, 随着传代培养时间的延长, 细胞开始呈现一定程度的老化现象。鉴于过度的传代培养会导致hUC-MSCs出现老化征象, 建议用于干细胞临床治疗的hUC-MSCs体外培养最好不超过第10代。
有研究分别对胎盘间充质干细胞P5、P10和P15代细胞的增殖能力进行了检测，结果显示P5代间充质干细胞的增殖能力明显高于P10和P15代，实验结果表明，胎盘间充质干细胞在体外培养时，随着细胞代次的增加，细胞会逐渐出现的老化。由于胎盘干间充质细胞在P5代后增殖能力会逐渐的下降，所以作为临床应用时最好选择P5代以下的为宜。
染色体细胞核型没有明显易位和缺失等变化，相关基因表达量略有差异，培养基内分泌的细胞因子保持稳定。
研究表明（利用无血清培养基培养的）脂肪间充质干细胞在传代至5代的过程中，生物学特性及遗传特性基本稳定，没有明显变化。初步揭示了脂肪间充质干细胞体外传代至第5代以内可以安全使用。
因此，代次太靠前或者太靠后都不是最好的选择，同时也要考虑培养条件的因素才能做出最佳的选择。
03 干细胞自体好还是异体好？
近几天又多次遇到这个问题，其实还真挺难回答，因为在不同的应用场景下，答案是不同的。
就好比，大家都会毫不犹豫的认为自家种的粮食、水果、蔬菜是最好的，但实际上现在很多专业的标准化和规范化的农场栽培的作物更严谨也更安全。只是说自家种植的全过程我们是能把控的，照样也会施肥打农药，至于用量是否合理也不用管，只求心安理得，自己的永远是最好的。
当然这里面涉及到别人种植的会乱来的情况，这个属于道德层面的范畴，不在我们技术讨论层面。
百度一下这个问题，会有很多的答案出来，比如这个频率出现会比较高：
真要揪这里面的问题，可能一个篇幅都不够，概念不清，定义不明，专业不熟。
自体有自体的好处，最大的优势在于不涉及伦理问题(自取自用)，外源基因的风险低（成体这么些年自体基因变化的风险是不是也应该考虑一下）、排斥反应小（不管是自体还是异体都是要在体外培养的，虽说实验室培养尽可能的模拟人体环境，但始终还是有有差异的，从某种程度上来说自体和异体接受了同样的教育，都已经不完全是它们最初的模样）、不用配型（配型仅限用于某些特殊疾病，而这些情况下几乎全部使用异体，自体那么好为啥还要异体的干嘛）等优势有待商榷，在没有详实的数据出来之前，不能自以为是。
异体有异体的优势，取材方便，不会对人体造成伤害，培养具有一致性和稳定性，但在某些只能或者优先使用自体的情况下，异体自动排到后面去。
还有一些公司的说法我很难理解，自体干细胞全是优点，异体干细胞全是缺点。我们来看一下全球已经上市的细胞药物和国内已经申报的干细胞疗法的统计，里面自体和异体的比例一目了然。
结论就是：不论是自体还是异体，都存在一定的风险性，自体唯一占了便宜的地方就是在法规上，而且在相当一部分情况下自体取材会需要经过很繁琐的流程，在保证同样的细胞质量的前提下，应该由专业的医生决定使用自体还是异体，甚至有些时候应该把主动权交给消费者自己选择，而我们应该做的只是如实告知利弊。
只有在应用达到一定的数量，有了更多的数据积累，我们才能更有资格去说是哪种好，而不是单单从理论层面凭空想象。
04 干细胞到了体内到底能存活多久？
干细胞能治疗多种疾病尤其是一些疑难杂症，是不争的事实，但是疗效各有差异，还有一些是没有疗效的案例，我们不得不开始从多个方面开始研究，到底是什么因素影响了细胞的疗效？
传统的化学药物也能治好很多的病，我们先来对比一下两者的区别：
化学药物是结构稳定的无生命物质，干细胞是有生命的功能单位；
化学药物有明确的半衰期，干细胞暂时没有发现；
化学药物有明确的作用靶点，干细胞通过多途径实现功能；
化学药物都是被动吸收，干细胞通过趋化性主动迁移；
化学药物均一性稳定，干细胞的细胞周期并不同步。
化学药物和干细胞一样的地方在于，两者都没有在体内长期滞留，而是随着时间的延长逐渐被机体清除。
动物试验显示，免疫系统越是健全的个体，免疫清除能力越强，干细胞在体内存活的时间就越短，免疫缺陷的机体，清除干细胞的能力就越慢。干细胞在体内被清除的速度还和输注的途径有一定的关系，静脉、动脉、局部定向输注、不同类型的干细胞等因素都会影响到干细胞输注到体内之后的存活时间。
虽说干细胞通过不同途径的在不同动物机体内的分布和代谢有过很多的研究，在不同的实验室也会得出不一样的结论，但是我们还是能通过数据的汇总得出一些结论：
干细胞在不同机体内存活的时间从几天到几个月不等；
静脉、动脉和局部注射（脑部、肌肉、心脏、肝脏、腰椎等）存活时间有差异；
自体和异体的干细胞回输存活时间差异不大；
静脉回输的干细胞可以突破血脑屏障，在体内的迁移偏好于血管的走向；
清髓后干细胞的存活时间略有延长，血管舒张剂对细胞的迁移和存活都有促进作用；
静脉回输的干细胞刚开始大部分被肺部截留，截留的细胞仍然可以通过因子的分泌减轻炎症和修复组织，随着时间推迟肺部滞留的细胞向其它器官转移；
干细胞的归巢带有一定的随机性，在不同机体的分布有差异。
从目前的研究结果来看，不管是局部注射还是全身性注射，不管是自体干细胞还是异体干细胞，机体均会逐渐清除干细胞，清除速度与多因素有关，包括机体免疫系统、输入途径、细胞来源的组织、细胞供体的年龄、细胞体外培养时间的长短等。
同时也因为干细胞趋化性的特点，健康机体和损伤机体的分布也不太一样，如果机体有多处损伤的话，干细胞到达某一损伤部位的数量也会不一样，尤其是有些隐形的疾病或损伤是我们所不能预见的，可能我们需要针对解决的部位成了漏网之鱼，因为干细胞并不能分辨某种损伤的严重程度，无法进行先急后缓的修复策略。
干细胞归巢是指自体或外源性的干细胞在多种因素的影响下，从血管内皮细胞定向性迁移至靶向组织并定植存活的过程。其中向缺血或损伤组织归巢是间充质干细胞重要特征。当机体组织器官缺血缺氧或者发生损伤后，通过释放炎性因子(如白细胞介素1，肿瘤坏死因子α)和趋化因子(如基质细胞衍生因子1)等多种成分入血活化间充质干细胞，同时可以在损伤部位周围形成配体的浓度梯度，从而趋化间充质干细胞沿浓度梯度向着缺血缺氧的目标组织定向迁移。
也因此，单次干细胞回输的效果不明显或者不能持久，需要我们跟化学药物有类似的操作，就是按照疗程，多久一次，一次多少量，首先起到一个比较明显的效果，然后巩固效果，最终达到从量变到质变的目的。
就如同，在我们口渴的时候，一杯水可以解渴，一口水只能缓解我们口渴的状态。
参考文献：略