三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的炎症性肠病动物模型

(一)实验动物

本模型可用大、小鼠、兔等实验动物造模,本文小虫主要介绍在小鼠上的造模过程。

8周龄,24 g体重的C57BL/6小鼠

(二)试剂耗材

1、实验试剂

TNBS、橄榄油、无水乙醇、丙酮、1mL注射器、软管(可用胆汁插管的软管)、涡旋仪

2、试剂配制

首先将TNBS溶于水,配制成5%TNBS(w:v)水溶液,然后配制橄榄油与丙酮比例为1:4(v:v)的均匀混合溶液,使用该混合液将5%的TNBS稀释为1%的TNBS溶液(或首先将TNBS溶于水,配制成5%TNBS(w:v)水溶液,然后使用无水乙醇将5%的TNBS稀释为1%的TNBS溶液)。

3、造模

小鼠背部去毛(1.5x1.5 cm),取配制好的1%的TNBS溶液150 μL均匀涂抹在去毛位置,七天后,动物称重并标记,小鼠麻醉后使用1ml注射器通过软管将100 μL的1%TNBS缓慢注射进入小鼠直肠内(软管插入直肠的长度大约4 cm),小鼠倒立保持约1 min,然后将动物放置回笼内,造模后持续观察动物状态,通过DAI评分判定动物成模情况。

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