Col1a1位点是什么?
Col1a1位点是2006年由Caroline Beard首先使用作为四环素诱导调控外源基因表达的整合位点。Col1a1位点实际上位于第11号染色体的Col1a1基因3'UTR下游约500bp左右。在四环素调控模型中,在TetO启动子之前往往加上SA-polyA来阻隔上游启动子的影响,防止不依赖于四环素的转录调控。
图3. Col1a1定点插入位点示意图。
图4. Col1a1位点四环素调控可逆过表达模式图。
例如,Col1a1-tetO-EGFP与Rosa26启动子驱动的rtTA工具鼠交配后,通过dox诱导,在小鼠体内可高效诱导EGFP的表达,且EGFP的表达谱与Rosa26启动子表达谱相一致。不过值得注意的是,在骨骼肌、脑组织和睾丸组织中没有EGFP的表达,后两者可能是由于血脑屏障和血睾屏障的关系。
图5. Col1a1位点dox诱导EGFP表达情况。
图6. Col1a1位点dox诱导EGFP表达概况表。
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