冰冻切片技术介绍、制片技巧 冰冻包埋组织固定 冰冻切片免疫组化操作 各类组织实际操作技巧－金锄头文库...

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1、13-5-26【转帖】冰冻切片技术介绍、制片技巧 冰冻包埋组织固定 冰冻切片免疫组化操作 各类组织实际操作技巧（连载补充） - 形态学与生理生化讨论 12 【转帖】冰冻切片技术介绍、制片技巧 冰冻包埋组织固定 冰冻切片免疫组化操作 各类组织实际操作技巧（连载补充） 精华 发新帖回帖 5 积分 10 得票 26 粉丝 加关注 2012-04-25 16:05 消息 引用 收藏 分享 只看楼主 tissueclearing edited on 2012-05-08 10:13 举报 嵌入式药品保存箱-海尔医疗电器 1票 票数 5 积分 10 得票 26 粉丝 加关注 2012-04-26 09:。

2、29 消息 引用 收藏 分享 0票 tissueclearing 常驻站友 切片技术最早期是从冰冻切片开始，后来逐步有了发展和更新，冰冻切片弥补了石蜡切片和火棉胶切片之不足，石蜡切片和火棉胶切片 需时太久，且在制片中要使用许多化学试剂，石蜡切片还需要加温过程，因而某些重要的不稳定的组织成分如脂类、酶以及抗体等，可 能被溶解和破坏。冰冻切片过程较简单，无须经过上述步骤，组织中的水分起着包埋剂的作用，组织经固定或不固定即可进行冰冻切 片，切片厚度一般可在6-8微米，组织没有收缩，易保持生活时原有状态，是保存脂肪组织，许多神经组织特殊染色方法和组织化学方 法，特别是酶的活性十分理想的切片方法，对于外。

3、科临床诊断和现代免疫荧光诊断，冰冻切片也很重要。其缺点是组织过大不易冰冻， 连续切片困难。5微米以下切片不易成功。但是随着现在冰冻包埋液的不断改进，已经能切出少于3微米的切片 一、直接冰冻切片法 冰冻切片多用于新鲜组织、甲醛固定组织和冰箱冷藏组织等。组织块不经任何包埋剂而直接放在制冷台上冷却后再进行切片。 1恒冷箱切片就是将组织在恒冷箱的切片机切片。目前恒冷箱切片机的品种较多。此种切片适用于科研和教学上的连续切片。要求预先 开动电源（预冷准备），配多种固定组织台，以便更换组织。 2甲醇制冷器制冷箱为附有带导管的制冷台和制冷刀的甲醇循环装制，其冷却速度比较快，属于开放式，作一般常规冰冻切片用。 。

4、3二氧化碳冰冻法将组织用蒸馏水洗后，放在冰冻切片机的冷冻台上，加蒸馏水少许。打开冷冻台的二氧化碳开关，二氧化碳气体喷 出，待组织出现冷霜时，将二氧化碳关闭，即可切片。若组织冷冻过硬则切片易碎；组织冷冻硬度不足，则切片呈粥糜状，需用间歇方 法继续冷却。硬度一般在刚开始解冻时最合适，应迅速切片。 4半导体致冷冰冻切片法将组织置半导体致冷台上，滴加少许蒸馏水，调好切片机的厚度。先接通热器的循环流水，然后接通电源，电 源的正负极切勿接反，用整流电源控制温度。 二、明胶冰冻切片法明胶包埋法一般多用于冰冻切片易破碎的组织，特别是某些有树枝状突起的组织，当其切片后投入水中时，常常引 起分散，甚至发生丢失，某。

5、些间隙较多的组织，有时会因发生散乱而失去相互间的联系，可形成移位现象。明胶冰冻切片正是适用于上 述情况。 环保组织固定液固定后必须充分水洗，洗净。因甲醛对明胶有凝固作用，从而影响明胶溶液浸入组织内部,不宜选用含甲醛类固定液。 组织水洗后浸入12.5%明胶水溶液(以1%石碳酸水溶液配制)，于37温箱浸6-24h。 移至25%明胶溶液内浸6-24h。 25%明胶包埋，连同包埋器放入冰箱内使明胶迅速凝固，取出后在空气中蒸发10min 。 入环保组织固定液固定明胶块1-2日。 蒸馏水洗后，置冰冻切片机或滑动式切片机切片。切片可保存于10%甲醛液中。 依检查目的而进行染色，染色后一般不经乙醇脱水及二甲苯。

6、透明，而用下述明胶溶液或其他类似的明胶溶液封片：果糖26g,明胶 1.1g，钾矾0.75g，麝香草酚水溶液1.15ml。 先将果糖溶于麝香草酚饱和液，置于56温箱内12h，加明胶后在水浴内加温熔化， tissueclearing 常驻站友 过滤后加钾矾。于100ml溶液内加甲醛2ml防腐。 三、冰冻切片粘片法 1蛋白甘油粘片法冰冻切片粘片法基本上按石蜡切片的粘片处理，但烘烤的温度不超过40。待烤干后立即取出，时间过久或温度过高 则切片易破碎。烤干后用70%乙醇及蒸馏水洗后即可染色。 2Lillie明胶粘片法将切片放入1%明胶水溶液数分钟，捞出置于载玻片上，将多余液体倾去。入环保组织固定液中固定。

7、5min,水洗 10min，即可染色。 3乙醇明胶粘片法切片浸入0.1%或0.75%明胶溶液（以40%乙醇配制）数分钟，捞于载片上，经室温短时干燥，入氯仿1min ,经95%及 70%乙醇洗去氯仿，再经蒸馏水洗后染色。 四、冰冻包埋液包埋切片 OCT Compound 法 现在国内外有许多厂家用高分子材料配制成冰冻切片包埋液，将冰冻包埋液直接可直接在切片机组织卡盘（chuck）上加少许包埋液，在 其固化前嵌入组织块，然后再于组织周围加入少许包埋液稳定。常规切片，厚度2-100微米。 或者在盛标本的包埋模具内，挤出适量冰冻包埋液，放入组织块或细胞沉淀块，加包埋剂完全淹没组织块，如有气泡可用针头或。

8、吸头吸 出。速冻：将盛有组织细胞和包埋液的模具，正置于切片机冷室内冰冻10分钟，至包埋液固化。也可将盛有组织的模具置于液氮或-40- 70度冰箱冰冻固化保存，用前取出置于切片机冷室内平衡温度（否则损坏刀片）。 冰冻包埋液是由高分子聚合物组成的透明粘稠液体，速冷时固化，其冰冻速度和软硬韧度与组织细胞相近，因此能保证最佳O.C.T.，并 具有支持填充、减少皱褶和断裂的作用。能切出2-3微米的超薄切片。国内较好的品牌有西奈山冰冻包埋液。 形态学与生理生化 论坛首页 形态学与生理生化讨论版 病理 搜索 获 取 版内 东风畏无力 提醒 2退出首页我的丁香客精品栏目找人随便看看更多 13-5-26【转帖】。

9、冰冻切片技术介绍、制片技巧 冰冻包埋组织固定 冰冻切片免疫组化操作 各类组织实际操作技巧（连载补充） - 形态学与生理生化讨论 tissueclearing edited on 2012-04-26 09:39 举报 微血管张力测量系统 票数 5 积分 10 得票 26 粉丝 加关注 2012-04-27 09:59 消息 引用 收藏 分享 举报 恩晶小规格抗体 0票 票数 2012-04-28 11:07 消息 引用 收藏 分享 tissueclearing 常驻站友 冰冻切片组织块的准备 1.调整好组织与刀片的方向 这是冰冻切片准备中极为重要的方面，使用冰冻切片组织包埋液可以使这项工作变。

10、得简单，在我的工作中我总结出一些经验可供参考。 a.脂肪放在最后切。脂肪由于硬度不够，对绝大多数组织均合适的温度却切不好脂肪组织，如果一刀下去，组织中的脂肪先接触刀片， 就会破碎并使整个片子损坏。如果脂肪最后接触刀片，则切片过程不受干扰。最糟糕的情况是脂肪部分先接触刀片而没有冰冻切片包埋 液（如西奈山品牌）的保护，冰冻包埋液可以给片子提供一个起始的缓冲，如果没有包埋，脂肪就会切碎并把整个片子破坏。当切片过 程中由于脂肪的出现而影响质量时，我要么把摇柄转回去尽量避免，要么把脂肪挖出来。 b.组织与刀片垂直或成角是关键。让我们假设组织由起始端、中间部分及末尾端三部分构成，起始端容易卷缩，或受到刷子。

11、的损害，还 可能由于操作者的犹豫而引起片子的厚薄不均，这些都增加了假象的风险。末尾端在贴片时容易拉长，最好的是中间部分，最不可能出 现假象，并且组织学上最干净，这是片子中最理想的部分。 非常坚实的组织容易产生横皱，切片时应包埋成角且尽可能的加温。成角包埋就像坐着船冲浪一样，如果你直线行驶，就会承受波浪线 上最大的冲击，如果成角行驶，波浪线就会拉伸，所受的颠簸也会减小。跟公路上的减速脊一样的原理。 上皮和粘膜贴附的组织如皮肤，胃肠，膀胱，子宫，颈部等，应当使上皮面垂直于刀片（见下图）。 tissueclearing 2.组织块的温度 任何组织都有一个理想的切片温度，在此温度下切片，组织片以平滑均。

12、一的形式流过刀片，几乎没有卷缩。当温度、组织类型、刀片均 处于理想状态时，切片十分流畅，几乎不用刷子。如果温度太低，片子容易卷曲和破碎；如果温度太高，片子就会皱成一堆。如果需要 加温，只需要把大拇指置于组织块面几秒钟；如果需要降温，可以使用机子的精确低温包埋系统，简单的做法就是把过冻的冻台放在组 织面上几秒钟，大多数的冰冻切片机都有一种热吸收器可以使用。 3.组织块的填涂基本的修复 填涂可以解决组织块自身的缺陷，下面我举几个具体的例子。 丁 当 的 22 个 绝 招 13-5-26【转帖】冰冻切片技术介绍、制片技巧 冰冻包埋组织固定 冰冻切片免疫组化操作 各类组织实际操作技巧（连载补充） - 。

13、形态学与生理生化讨论 5 积分 10 得票 26 粉丝 加关注 tissueclearing edited on 2012-04-28 14:58 举报 从“秘方治癌案”反思中国癌症的过度医疗 0票 票数 0 积分 1 得票 0 粉丝 加关注 2012-05-01 13:41 消息 引用 收藏 分享 举报 中级考试成绩是原始分还是经过处理的？ 0票 票数 5 积分 10 得票 26 粉丝 加关注 2012-05-02 09:12 消息 引用 收藏 分享 常驻站友 (1)扁平包埋组织的填涂 包埋扁平的组织时，只有一层薄薄的包埋物贴附在底面，而且包埋物会轻微地收缩与组织块分离，如果想以最小的休整。

14、开始切片，那么 收缩的空间必须填涂上包埋物，如果不填涂，切片时组织便会与包埋物分离，从而很难获得一张完整的片子。下面这个简单的技巧可以 使你获得一个整齐的组织面。 wulimao 入门站友 还不能投票，那就回复支持一下，好贴，很实用 tissueclearing 常驻站友 (2) 针头的移除 在工作中经常会收到布满针头的标本，有时候针头会穿过整个组织，导致刀片的损坏并使片子一分为二，下面有一种简单的解决办法。 13-5-26【转帖】冰冻切片技术介绍、制片技巧 冰冻包埋组织固定 冰冻切片免疫组化操作 各类组织实际操作技巧（连载补充） - 形态学与生理生化讨论 举报 多肽合成、多肽修饰等服务 0。

15、票 票数 5 积分 10 得票 26 粉丝 加关注 2012-05-03 09:43 消息 引用 收藏 分享 举报 重庆莱美药业股份有限公司招聘合成实验员 0票 票数 5 积分 10 得票 26 粉丝 加关注 2012-05-03 10:09 消息 引用 收藏 分享 tissueclearing 常驻站友 接到标本后快速冰冻。 2、切片厚度67微米。 3、切片完整，无污染，无皱褶。 4、切片完成后立即固定。 5、染液，脱水液必须及时更换。 6、封固前必须经酒精脱水，环保组织液透明，湿封。 7、封片时不得有气泡，不得有树胶外溢。 8、标签必须贴于玻片左侧，编号字迹必须清楚。 9、制片工作一般应在1520分钟内完成。 10、冰冻报告后及时将“冰对”组织放入环保组织固定液内。 11、每天操作完成后，及时对机器进行清理和消毒。 tissueclearing 常驻站友 （3）缝线的移除 同样的方法移除组织块中的缝合线 （4）挖凿的技术 13-5-26【转帖】冰冻切片技术介绍、制片技巧 冰冻包埋组织固定 冰冻切片免疫组化操作 各类组织实际操作技巧（连载补充） - 形态学与生理生化讨论 举报 第三军医大学基础部招聘基础医学博士后-张绍祥课题组 0票 。