LCK-Cre小鼠构建技术原理
为了以组织特异性的方式选择性地灭活基因,许多实验室开发了cre转基因小鼠菌株,其中cre重组酶在组织特异性启动子的控制下表达。LCK-CRE转基因小鼠使用Lck(淋巴细胞蛋白酪氨酸激酶)基因的近端启动子,该启动的首先表达在胸腺细胞发育的早期,即细胞处于双阴性阶段。在T细胞完全成熟后,这种转基因的表达水平下降了大约10倍。 这种特殊的小鼠它的转基因在胸腺中表现出较高程度的表达,并发现在几乎所有早期胸腺细胞中导致由LOXP靶向序列侧翼的基因的选择性缺失。因此,这将是有用的实验,旨在t细胞谱系中,从双阴性阶段开始敲除一个特定的基因。
由于该动物中的lck-cre转基因是纯合的,人们可以简单地将小鼠杂交到任何含有感兴趣的Floxed基因的动物中,并获得以这种组织特异性方式删除的后代。如果你的动物是杂合子的,你也可以通过在基因组DNA尾部样本中是否存在Floxed基因来获得同一窝中的对照动物。 克里斯威尔逊博士最近发现,他的lck-cre转基因小鼠可以在某些背景下的一些小鼠的非淋巴组织中导致部分完全缺失。 这些情况是不可预测的,但在尾部DNA样本中是明显的。 调查人员应该确定这种异常是否存在于他们的十字架中。
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