CRISPR/Cas9 活性检测技术原理

利用CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的gRNA序列是通过各个 gRNA设计网站 中预测得到的，这些gRNA是否有功能往往需要通过具体的实验验证才能得到，而获得基因编辑的细胞系或小鼠的周期长达几个月甚至半年，因此如何能够快速、准确的验证CRISPR/Cas9系统是否有效成为开展基因功能研究的关键。为此，多种CRISPR/Cas9功能检测方案：

1、gRNA活性检测试剂盒可以快速检测您所设计的核酸酶Cas9系统、切刻酶Cas9系统是否有效，若未检测到荧光表达信号，则设计的gRNA肯定无法在基因组中进行敲除；同时可以通过流式细胞仪对敲除效率进行定量分析。

2、利用错配酶法快速检测对基因组目标靶点是否成功编辑,并可粗略判断基因敲除效率。

3、利用测序技术，真实检测靶点序列的变化，直观判断突变情况。