表位特异性抗体制备方法(臂免疫磁珠)
表位特异性抗体制备方法抗体是机体在抗原物质刺激下由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。表位特异性中和抗体是一种可以识别特定表位的免疫球蛋白,其与病毒结合,可有效阻止病毒对宿主细胞的感染。目前常用的杂交瘤技术制备的抗体多为鼠源性,在其他物种体内具有免疫原性,用于人体可产生人抗鼠抗体反应,从而影响治疗效果。直接从免疫血清中分离纯化高特异性抗体可很好的解决这个问题。免疫磁珠作为抗体纯化的有力工具,针对磁珠本身的结构设计和性能提升的研究,是材料科学和生命科学的交叉热点。获得结构稳固、亲和配体接枝率高、成本低廉的免疫磁珠对抗体纯化工艺的发展具有重要的意义。该方法采用一种动态模板聚合法(IDDT),在短时间内成功制备了多臂有机-无机杂化磁珠,突破了微纳尺度下球状基体表面聚合物三维拓扑结构修饰的难点,在磁珠表面成功构筑了多臂纳米化结构。进一步利用多臂结构上的残余双键与末端带有半胱氨酸的抗原表位进行Click反应,得到了可用于分离纯化相应表位特异性抗体的多臂免疫磁珠。
该多臂免疫磁珠制备成本低、反应条件温和、层间结构稳定(有机层直接包裹磁核)、比表面积大、表位负载量高(多臂纤维结构提供更多共价反应结合位点),而且柔性聚合物交联纤维具有更好的机械稳定性能(适用于苛刻环境,重复利用率高),是一种优良的生物捕获-分离材料。与不具备三维拓扑结构的磁珠相比,其对特异性抗体的纯化效率可提高一倍以上,充分体现了其“多臂”功力。经分离纯化得到的抗体能够特异性识别相对应的抗原,有效阻止病毒对细胞的入侵,具有良好的中和活性。
该方法为免疫磁珠的结构设计提供了一种全新的思路,易于获得高特异性的中和抗体,且获得的抗体具有检测和治疗相应病毒感染的能力,可以作为预防、诊断和治疗的候选试剂。基础磁珠二氧化硅磁珠琼脂糖磁珠聚合物磁珠葡聚糖纳米磁珠标记免疫与捕获磁珠生物配体快速偶联磁珠免疫沉淀试剂盒链霉亲和素磁珠蛋白纯化磁珠抗体纯化磁珠His-tag蛋白纯化磁珠GST融合蛋白纯化磁珠Strep-tag II蛋白纯化磁珠肝素磁珠DEAE磁珠核酸提取磁珠游离DNA提取试剂盒唾液基因组提取试剂盒粪便核酸提取试剂盒血液基因组提取试剂盒病毒DNA/RNA提取试剂盒DNA片段筛选PCR产物纯化试剂盒凝胶回收试剂盒质粒DNA小量抽提试剂盒Oligo dT磁珠微球产品名称表面基团Eu-时间分辨荧光纳米微球聚苯乙烯-羧基PS(-COOH)Eu-时间分辨荧光纳米微球聚苯乙烯-亲和素PS(-SA)Sm-时间分辨荧光纳米微球聚苯乙烯-羧基PS(-COOH)彩色微球(红色/粉色/橙色/黄色/绿色/蓝色/黑色)聚苯乙烯-羧基PS(-COOH)磁性微球聚苯乙烯-羧基PS(-COOH)PS纳米微球/空白微球聚苯乙烯-羧基PS(-COOH)层析填料产品名称对应GE产品NI-CrystaroseC FF/镍亲和层析填料Chelating FFCNBr-Activated Crystarose 4B/溴化氢活化琼脂糖凝胶 4BCNBr-Activated sepharose 4BCNBr-Activated Crystarose 4FFCNBr-Activated sepharose 4FFCNBr-Activated Crystarose 6BCNBr-Activated sepharose 6BCNBr-Activated Crystarose 6FFCNBr-Activated sepharose 6FFNHS-Activated Crystarose 4FFECH Crystarose 4BECH sepharose 4BEAH Crystarose 4BEAH sepharose 4BEpoxy-activated Crystarose 4BEpoxy-activated sepharose 4BECH Crystarose 6BECH sepharose 6BEAH Crystarose 6BEAH sepharose 6BEpoxy-activated Crystarose 6BEpoxy-activated sepharose 6BCrystarose 2BSepharose 2BCrystarose 4BSepharose 4BCrystarose 6BSepharose 6BCrystarose 2FFSepharose 2FFCrystarose 4FFSepharose 4FFCrystarose 6FFSepharose 6FFCrystarose DEAE FFSepharose DEAE FFCrystarose CM FFSepharose CM FFCrystarose Q FFSepharose Q FFCrystarose SP FFSepharose SP FFCrystarose Protein A FFSepharose Protein A FFCrystarose Protein G FFSepharose Protein G FFCrystarose Protein A HPSepharose Protein A HPCrystarose Protein G HPSepharose Protein G HPCrystarose 2HPSepharose 2 HPCrystarose 4HPSepharose 4 HPCrystarose 6HPSepharose 6 HPCrystarose DEAE HPSepharose DEAE HPCrystarose CM HPSepharose CM HPCrystarose Q HPSepharose Q HPCrystarose SP HPSepharose SP HPCrystarose NI FFSepharose NI FFCrystarose NI HPSepharose NI HPCrystarose GST FFSepharose GST FFCrystarose GST HPSepharose GST HPwyf 02.01