细胞增殖检测实验介绍
细胞增殖(cell proliferation)是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。 通过对比不同细胞组别的生长曲线,比如野生型VS突变体、对照VS过表达、对照VS敲降等等来判断所构建的细胞系的增殖状态是否有显著差异,进而可以选择进行细胞周期或细胞凋亡的检测,如图1呈现的是过表达p62对U87和U251细胞系增殖的影响。
检测细胞增殖的方法有很多,其中常用的是CCK-8检测法和活细胞计数法。计数法不必多说,科研人必备技能,而CCK-8检测法是利用正常细胞的线粒体内含有的琥珀酸脱氢酶可将四唑盐类物质还原为紫色结晶状物质的原理,当这些紫色物质沉积在细胞周围,可以通过酶标仪读取450nm OD值(optical density),从而检测细胞增殖状态。其他方法如BrdU染色法和Ki-67检测法,可以反映出增殖细胞的空间分布,但只能捕获单一时间点的增殖细胞比例,因此一般用于检测组织切片的细胞增殖。
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