原代细胞永生化技术实验流程

体外培养细胞在发育、组织维持与重塑、肿瘤发生机制、再生医学、新药开发等生命科学各研究领域中发挥了重要作用。原代细胞经过有限代数的增殖后通常会出现衰老死亡，因此生物学家需要不断地用组织重新进行原代培养以进行相应研究。细胞永生化为这一问题提供了一个解决方案。永生化细胞来源于脱离了正常衰老死亡过程并获得持续分裂能力的原代细胞，具有易于培养和传代、均一性好等优点。细胞永生化的方法包括放射处理、端粒酶激活、病毒基因转染、原癌基因激活或抑癌基因抑制等，通过重组慢病毒感染使细胞过表达猴肾病毒SV40 T抗原或人端粒酶逆转录酶hTERT基因是最常用的两种细胞永生化方法。

　　原代细胞永生化实验流程