磁珠法分离400-600bp DNA片断的步骤

当前主流观点认为,处于PEG和盐离子环境中的DNA,因脱水作用而发生分子构象改变后,会暴露出磷酸骨架上大量的带负电荷的磷酸基团,与表面带负电荷的羧基磁珠结合。负负电荷之间的作用是由于带正电荷的盐离子的作用(如Na+;图2)。带负电的磷酸基团借由解离的盐离子(如Na+)与羧基形成离子桥,使DNA被特异性吸附到羧基磁珠表面。当PEG和盐类被去除之后,加入水性分子,会快速充分水化DNA,解除其三者之间的离子相互作用,使得吸附到磁珠的DNA被纯化出来。

操作的具体步骤如下图3(0.6x代表DNA溶液体积的0.6倍;该倍数要依据各自不同的实验体系自行检测调整):

磁珠法分离400-600bp DNA片断的步骤

如果只是分离纯化单条带PCR产物,我们通常使用1.2x的磁珠,与PCR产物在EP管内混合后放在磁力架上1分钟,丢弃上清,70%酒精洗涤两次后室温干燥,然后将EP管从磁力架上取下,TE或者纯水与磁珠混合,然后放回磁力架取上清,整个过程耗时约15分钟。

磁珠DNA分离法中多次使用了磁力架,来使磁珠聚合并方便除去洗脱液。一般进口磁力架(针对EP管或者96孔PCR板)约1000-5000人民币,而我们实验室(中国海洋大学海洋生物多样性与进化研究所-进化基因组学研究室)能够通过3D打印机自行打印并使用了稀土材料制作的高强永磁铁,效果甚至好于商业化产品。

功能化磁珠 羟基磁珠
羧基磁珠
氨基磁珠
环氧磁珠
甲苯磺酰基磁珠
提取核酸磁珠及配套试剂 羟基磁珠(二氧化硅磁珠)
羧基磁珠
DNA片段分选纯化磁珠
oligo(dT)磁珠
PCR产物纯化磁珠
多合一核酸提取试剂盒-磁珠法
链霉亲和素磁珠
全基因组核酸提取结合液
游离循环/病毒核酸提取裂解结合液
免疫检测磁珠及配套试剂 羧基磁珠
氨基磁珠
环氧磁珠
链霉亲和素磁珠
ALP碱性磷酸酶化学发光底物
Flag标签抗体磁珠
GST标签蛋白纯化磁珠(GSH磁珠)
His-tag标签蛋白纯化磁珠(镍磁珠)
ProteinA磁珠
ProteinG磁珠
StrepTactin磁珠(纯化Strep tag II标签蛋白)
磁珠偶联抗体(蛋白)封闭液
磁珠偶联抗体(蛋白)试剂盒
电化学发光链霉亲和素磁珠
甲苯磺酰基磁珠
碱性磷酸酶
抗FITC荧光素抗体磁珠
免疫磁珠保存液
进口品牌磁珠 羧基磁珠/Agliant链霉亲和素磁珠
羧基磁珠和Merck链霉亲和素磁珠
Sera-Mag® Magnetic SpeedBeads™ Carboxylate-Modified Particles
抗体磁珠 CD2抗体磁珠
CD3抗体磁珠
CD4抗体磁珠
CD8抗体磁珠
CD14抗体磁珠
CD15抗体磁珠
CD19抗体磁珠
CD25抗体磁珠
CD31抗体磁珠
CD34抗体磁珠
CD45抗体磁珠
Flag标签抗体磁珠
GFP标签抗体磁珠
GST标签抗体磁珠
HA Tag抗体磁珠
His标签抗体磁珠
HSV Tag抗体磁珠
Myc标签抗体磁珠
抗FITC荧光素抗体磁珠
山羊抗兔IgG抗体磁珠
山羊抗小鼠IgG抗体磁珠
鼠抗人IgG抗体磁珠
鼠抗兔IgG抗体磁珠
兔抗人IgG抗体磁珠
兔抗鼠IgG抗体磁珠
磁珠磁力架 0.2ml八联排管磁力架
0.4ml/0.5ml磁力架
1.5ml磁力架/2ml磁力架
2ml磁力架(平底)
4ml/5ml磁力架(尖底和圆底)
10ml磁力架
15ml磁力架
50ml磁力架
96孔PCR板磁力架
96孔酶标板磁力架
96孔深孔板磁力架(1.2ml和2.2ml)
磁力板(试管专用)
磁力架多管混匀器
多功能磁力架
万能磁珠控温混匀器
偶联标记技术服务 抗体(蛋白)和磁珠的标记
磁珠和寡核苷酸探针的标记
小分子和抗体(蛋白)的标记
抗体(蛋白)的纯化
抗体 HRP标记的抗体
Biotin标记的抗体
Fitc标记的抗体
AU标记的抗体
所有常见二抗
所有常见一抗
抗荧光素抗体(FITC抗体)
HRP标记小鼠抗人IgG二抗
HRP标记山羊抗人IgG二抗
AP标记山羊抗人IgG二抗
AP标记小鼠抗人IgG二抗
c-Myc / Myc Tag
CBP Tag
E2b Tag
Flag / DYKDDDDK Tag
GFP pAb
GFP Tag
GST Tag
HA Tag
His Tag
HPC4
HSV Tag
MBP Tag
SUMO Tag
T7 Tag
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V5 Tag
VSV-G Tag
层析空柱 不锈钢空色谱柱
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