太赞，珍贵多图！袁圣等大咖手把手教你建立标准化鱼体检查流程|②鳃丝镜检的标准化
江苏农牧科技职业学院 袁圣、河海大学 赵哲、青岛农业大学 章晋勇、江苏省淡水水产研究所 薛晖、江苏省渔业技术推广中心 陈辉
水生动物病害已经成为制约行业发展的重要瓶颈，通过标准化的鱼体检查，提前发现小问题，处理小问题，避免形成大的问题意义重大。饲料企业、动保企业未来的竞争核心也会偏重于服务的质量，同样需要建立标准化的服务流程。现就标准化服务流程的构建作粗略的设想，以期抛砖引玉，更好的服务养殖一线。
鳃是鱼类的主要呼吸器官，也是非常容易病变的组织，对鳃丝进行镜检是鱼体检查的重要工作之一，鳃丝的镜检应做好两个标准化，分别是鳃丝水浸片制作的标准化和显微镜使用的标准化。
鳃丝水浸片的制作步骤：（鳃丝水浸片制作的标准化）
a.准备好干净的载玻片、盖玻片；
b.从3部位处（图1）剪取适量鳃丝，放置于载玻片上;
c.用剪刀将鳃丝推到载玻片中间，用胶头滴管滴一滴生理盐水（或塘水）到鳃丝上;
d.将盖玻片贴着载玻片边缘轻轻往下放，直至接触到鳃丝;
e.轻压盖玻片，使鳃丝均匀分布。
图1：鳃丝水浸片选取位置图，图2：通过镜检可发现初期的烂鳃
鳃丝水浸片制作过程中的注意事项：
a.选取的鳃丝最好是靠近下颌部位的，此处寄生虫相对较多；
b.鳃丝剪取时要适量，剪取过多会导致压片不匀，鳃丝相互重叠影响观察，鳃丝剪取过少可能导致样品观察不够细致；
c.压片时，应轻轻的按压盖玻片，如果按压过重会导致鳃组织被压碎，大量的血细胞等流出，影响观察结果，按压过轻则会导致鳃丝压不匀，相互重叠影响观察结果。
d.压片的速度不能太快，否则会有大量气泡被压进水浸片中，影响观察。
图3:剪取鳃丝过多导致压片不匀，影响观察，图4：压片用力过大导致组织破碎，影响观察
图5：压片过快产生大量气泡，影响观察，图6：正确压片后鳃丝相互分离，便于观察
显微镜的操作步骤：（显微镜使用的标准化）
a.将组装好的显微镜插上电源，观察是否通电;
b.将制作好的鳃丝水浸片置于载物台上，用夹子固定好，并将物镜中的低倍镜调节至观察部位;
c.调节粗准焦螺旋，将载物台调节至离物镜最近处;
d.调动粗准焦螺旋，将载物台逐渐向下移动，直至看见物体;
e.调动细准焦螺旋，直至观察到清晰的图像。
f.对观察的物体进行记录。
在显微镜的使用中，需要注意的是：
a.观察时需要先用低倍镜观察，然后再用高倍镜进行观察（先用红色的物镜，再用黄色的物镜）；
b.注意光圈等细节的调节，往往将光圈调节到最小，观察的物体最清晰，进光量过多时视野较亮而无法观察到清晰的图像。
c.显微镜使用的插座最好有接地线，否则带水操作存在触电的风险。
图7：显微镜的外部构造，图8：通过光圈的调节可使观察更清晰
图9，10：同一视野下的显微图片-右图为调小光圈后的图像
重点观察寄生虫及鳃丝状况。常见的寄生虫可以通过镜检发现，如：指环虫、三代虫、车轮虫、小瓜虫、斜管虫等等；鳃丝的状况可作为评价鳃部是否病变的重要指标，如发现鳃丝有血窦时需要及时消毒处理。
图11,12：细菌感染引起的鳃丝溃烂-需对鳃丝进行镜检，以确定是否有寄生虫感染
图13,14：斜管虫可导致鳃丝粘液异常分泌（鱼苗扎堆）-斜管虫显微图片
图15：车轮虫显微图片引起鱼苗打转，图16：小瓜虫显微图片-示马蹄形的亮核（寄生部位形成白点）
图17，18：鳃部的孢囊-示孢囊的完整显微图片（包囊需被压破，才能看到里面的孢子虫）
图19：孢囊压破以后孢子虫的形态图，图20：鳃丝上的纤毛虫
图21,22：中华蚤寄生于鳃丝末端，引起鱼焦躁不安，尾鳍上翘-示中华蚤显微图
图23，24：钩介幼虫寄生于鳃丝可形成肉眼可见的白点-示钩介幼虫显微图片
25:三代虫显微图片-头部分为两叶，没有眼点，图26：指环虫显微图片-头部4叶，有4个眼点（三代虫、指环虫都属于单殖吸虫，可引起鳃丝粘液异常分泌，呼吸不畅）
图27：鳃丝上的血窦-提示为烂鳃初期，图28：鳃丝血管内的气泡
图29：烂鳃等可导致生理性缺氧的出现-即使池塘中溶氧充足，由于呼吸器官的坏死也可引起缺氧
袁圣简介
袁圣
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