冰冻切片中细胞外冰晶形态特点与形成原理知识清单

术中冰冻切片中常见的冰晶为细胞外冰晶。细胞外冰晶的形成会影响细胞与组织结构形态，增加术中冰冻病理诊断的诊断风险。细胞外冰晶的形态特点是什么？形成细胞外冰晶的原因是什么？我们通过怎样的冰冻制片操作方式可以减少细胞外冰晶的形成？

直播课程过后，将冰冻切片细胞外冰晶的知识要点列个清单，方便小伙伴们复习查阅。

冰冻切片中细胞外冰晶形态特点与形成原理

知识清单

1

细胞外冰晶的形态特点为：冰晶出现在细胞外，形态表现为不规则透明间隙。同时出现细胞收缩，组织形态结构变形。细胞的收缩导致冰冻切片染色不佳。

无细胞外冰晶形成

细胞外冰晶形成

2

水冷冻凝结会形成两种凝结方式：晶体态与玻璃态。快速冷冻组织，使组织形成玻璃态凝固方能保持细胞的正常形态。

3

细胞外冰晶形成的原理：组织冷冻速度缓慢时细胞外液先结冰。因为细胞膜的阻碍，细胞内液未结冰，水分子在细胞外形成冰晶引起细胞外液渗透压急速升高，细胞内液中未结冰的水分子快速渗出至细胞外，与细胞外现行形成的晶核形成冰晶体。

4

细胞内液的外渗引起细胞收缩，同时细胞外冰晶体对细胞形成挤压，导致细胞与组织的正常形态结构的明显改变。

5

仅仅使用冰冻切片机的速冻台冷冻组织，组织冷冻速度慢，整块组织都将形成细胞外冰晶。

6

加快组织冷冻速度的方法可以使用液氮、冷冻锤、其他辅助设备等手段 。

7

使用冷冻锤加速冷冻，细胞外冰晶由组织边缘开始出现，并向组织中间扩展。冷冻锤温度越低，细胞外冰晶开始出现的层面越深。

8

使用冷冻锤冷冻组织的注意事项：⑴组织托与包埋剂预冷，待底部凝固后发白，组织放上后立即用冷冻锤冷冻。并确保每一块组织的冷冻方式操作的一致性；⑵多块组织都按照正确方式冷冻完成后，再逐一切片；⑶冷冻锤冷冻过一块组织后，须在速冻台降温后再使用。

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