质谱专题 | 初识临床质谱——来自一线检验人员的心路有感
一、为“精准诊断”应运而生的临床质谱
笔者所在单位使用的某型MD串联质谱分析仪
MD串联质谱分析仪的粒子激发形成图谱
二、临床质谱实验室也需要质量控制的保障
1.分析前-采集样本
以新生儿遗传代谢病检测为例,样本来源选择干血片,通过采集婴儿合格的血斑,同时保证受检者信息正确录入。血斑在相应位置必须浸透采血卡晾干,及时送到实验室中,运输过程要求常温且杜绝污染,防止霉变等不合格干血片的出现。
2.分析中-检测样本
选择试剂(衍生或者非衍生法),需要先配置内标液(分装),配工作液(按样本比例取萃取液和项目内标),对干血片进行打孔(选取规定规格的打孔钳),按照空白、质控(C1)、质控(C2)、样本(N1、N2…)加入工作液浅孔板进行震荡孵育(转/分钟),带上流动相在液相上进行管路冲洗,排气,最后将锡箔纸封严的样本进行上机。
一般情况下,需要先完成内标和质控,确认无误后再上样本,以便保证结果正常测定。检测过程中,要注意设备状态,比如真空状态是否达到要求等。
3.分析后-审核报告
报告审核环节,需要宏观整个检测过程,把好质量分析的最后一把关。“人、机、料、法、环”每个环节都需要设定相应的QC(质量控制),才能为临床提供可靠可信的结果。
关于报告质量的重要性,检验人对此早已了然于胸。而需要强调的是质谱技术在检测效率方面的优势:传统新生儿遗传代谢病筛查多采用免疫方法学检测,一次仅可检测一种疾病项目,而在质谱技术的支持下,一次检测可以同时完成40多项。
三、从零开始学习质谱技术的体会
1.知己知彼,百战百胜
(1)学习掌握质谱仪的结构、组成部分及功能,原理,质谱仪种类
(2)根据工程师培训内容掌握冲洗A、B泵及各线路,更换离子源,调谐,校准和质控,上样。
(3)质谱软件的操作使用,掌握一定的英文提示信息。
(4)根据项目建立方法学,标准化实验流程,结果判断及分析。
(5)参加各类质谱学术会议以及质谱厂家开的学习班。
2.思维转移,方法沿用
(1)临床诊断实验室的质谱运用于生命科学,针对样本对象仍然为临床样本,血液及各种体液。
(2)建立临床思维,当分析过程中出现的不再是与细胞、糖链蛋白、激素、细菌、病毒对应的数据和箭头,而是各种物质质量的质荷比、化学复合物结构推算等技术时,依然可以熟练应对。
(3)检测方法,依然是前处理-上机测试-分析-看质控-图形-报告。
(4)质量控制方法依然是分析前、分析中、分析后。
3.活学活用,总结创新
(1)每个实验室的仪器设备都不一样,但是原理、方法、质量控制是永恒不变
(2)活学质谱分析技术,并且对每个检测进行有意识的分析,不断总结经验方法,建立自建方法
(3)质谱分析技术在临床领域还有很多可以开垦疆域的空间,熟练操作后,可以将知识经验升华后达到创新研发的能力水平。