腺相关病毒构建原理

微小病毒，其直径约20-26nm，含有4.7kb左右的线状单链DNA作为基因组。由于其血清型多样、免疫原性极低、安全性高、宿主细胞范围广（对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力）、扩散能力强、体内表达基因时间长等特点，AAV被视为最有前途的基因研究和基因治疗载体之一。

◆纯化后的AAV病毒载体可以用于侵染细胞，侵染细胞时，AAV与细胞表面特异性受体结合，激活胞内信号通路，进而触发AAV通过受体介导的内吞作用进入细胞，在核内体、高尔基体等细胞器的协助下进入细胞核，随后病毒裂解，其单链DNA复制成为双链DNA后表达目的基因。

◆AAV是表达小基因序列的理想载体，广泛应用于体内研究中。它们通常被用于向哺乳动物的大脑及各组织脏器递送外源基因、荧光标记、钙指示剂和生理操控工具等。

◆在借助AAV载体进行体内基因传递时，病毒的注射方式、注射体积及血清型的选择都是尤为重要。借助定点注射和系统注射，AAV载体能够在大量细胞中广泛表达，AAV不同的血清型对于不同细胞亦有一定的亲嗜性，在具体研究时需注意不同血清型的选择。

◆在体外实验中，传统观点认为AAV的效率有限，且感染细胞所需的MOI高。但近年来开发出的多种新型AAV载体为我们提供了一些新的思路，如AAV-DJ血清型的AAV对于体外培养细胞系的感染效率亦非常可观，这为广大研究者提供了新的思路。