细胞周期实验检测方法
流式细胞术是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球, 细菌, 小型模式生物等) 逐个进行快速定量分析和分选的技术,经单克隆荧光抗体或者核酸特异性染料对细胞进行染色后,通过FCM可以分析细胞的一系列参数。PI(碘化丙啶)为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系。通过对所有细胞进行染色,那些准备分裂的细胞将含有越来越多的DNA,并显示出比例增加的荧光,利用流式细胞术来检测荧光含量进而确定各个阶段细胞的百分比。需要注意的是由于PI染料不能进入活细胞,所以在染色前经常会用乙醇对细胞进行固定,另外PI也会结合RNA,进而对实验结果造成影响,所以需要额外加入RNA酶。
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