条件性基因敲除大鼠构建技术原理及流程
条件性基因敲除大鼠是通过把两个LoxP位点插入到目的基因的一个或几个重要外显子的两端以制备出有两个floxed大鼠。该floxed大鼠在与表达Cre重组酶大鼠杂交之前,该基因表达正常;当floxed大鼠与组织特异性表达Cre酶的大鼠进行杂交后,可实现在特定的组织或细胞中敲除该基因,而在其它组织或细胞中该基因表达正常。
建系原则与流程:
1、与野生型大鼠杂交:阳性CRISPR-Pro大鼠(+/flox)与野生型大鼠(+/+)杂交,获得F1代杂合子大鼠(+/flox);
2、挑选一对F1代杂合子大鼠(+/flox)进行自交,获得F2代纯合子大鼠(flox/flox)
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