三羟甲基氨基甲烷饱和酚的详细配置步骤
Tris全称:三羟甲基氨基甲烷,作为一种常用的化工品在各大领域都有着十分广泛的应用。例如在医药、日化品、特殊材料等等领域都能看到Tris的身影,而在其中有一种应用,”核酸纯化”。核酸纯化则需要饱和酚,Tris也有饱和酚,也称为碱性酚、Tris平衡酚。Tris饱和酚是用是用Tris-ClpH8.0饱和过的重蒸酚,为浅黄色透明液体,有刺激性气味,上层为Tris盐酸缓冲液,溶液内加有抗氧化的8-羟基喹啉。适用于从核酸样品中去除蛋白质,提取DNA等。虽然现在市面上有现成产品售卖,但是掌握着Tris饱和酚的配置方法还是要好一些。下文将介绍Tris饱和酚的详细配置步骤。
Tris饱和酚:
1、冰箱取出重蒸酚,室温放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂;
2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也能在烧杯中进行);
3、加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层;
4、加固体Tris约1g/100ml酚,摇匀,去水相;
5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至PH为8.0;
6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存;
7、如黄色消失或呈粉红色,则不能使用。
Tris饱和酚具有毒性,对皮肤和人体有着强烈刺激性作用,需要在通风橱中进行操作。避免危害,安全第一。
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